အပင်နှင့် ပိုးသတ်ပစ္စည်းများ
ပြောင်းဖူးပြောင်းလူဦးရေ (SCP) ဟုသိကြသော ပြောင်းဖူးပေါင်းအသင်းမြေပုံဆွဲလူဦးရေကို အီလီနွိုက်စ်တက္ကသိုလ် (ယခု UC Davis) မှ ဒေါက်တာ Pat Brown မှ ပံ့ပိုးပေးခဲ့ပါသည်။၎င်းကို ယခင်က ဖော်ပြခဲ့ပြီး US ပတ်ဝန်းကျင်ရှိ အပင်များ၏ ကြီးထွားမှုနှင့် ဖွံ့ဖြိုးတိုးတက်မှုကို လွယ်ကူချောမွေ့စေရန် photoperiod-insensitivity နှင့် သေးငယ်သော အရပ်အဖြစ်သို့ ပြောင်းလဲထားသော ကွဲပြားသောမျဉ်းများစုစည်းမှုတစ်ခုဖြစ်သည်။ဤလေ့လာမှုတွင် ဤလူဦးရေမှ လိုင်းပေါင်း 510 ကို အသုံးပြုခဲ့ပြီး မျိုးပေါက်မကောင်းခြင်းနှင့် အခြားသော အရည်အသွေးထိန်းချုပ်မှုဆိုင်ရာ ပြဿနာများကြောင့်ဖြစ်သော်လည်း စရိုက်သုံးရပ်စလုံးကို ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာရာတွင် လိုင်းအားလုံးကို အသုံးမပြုပါ။အဆုံးစွန်အားဖြင့် 345 လိုင်းများမှဒေတာများကို chitin တုံ့ပြန်မှုကိုခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာရန်၊ flg22 တုံ့ပြန်မှုအတွက် 472 လိုင်းနှင့် TLS ခံနိုင်ရည်အတွက် 456 ကိုအသုံးပြုခဲ့သည်။B. CookeiLSLP18 ကို Arkansas တက္ကသိုလ်မှ ဒေါက်တာ Burt Bluhm ထံမှ ရရှိခဲ့သည်။
MAMP တုံ့ပြန်မှု တိုင်းတာခြင်း။
ဤလေ့လာမှုတွင် မတူညီသော MAMP နှစ်ခုကို flg22၊ (Genscript catalog# RP19986) နှင့် chitin တို့ကို အသုံးပြုခဲ့သည်။စပါးပင်များကို ဖန်လုံအိမ်ရှိ 33% Sunshine Redi-Earth Pro Growing Mix) မြေဆီလွှာများ ဖြည့်ထားသော တိုက်ခန်းများတွင် ထည့်သွင်း စိုက်ပျိုးထားပါသည်။စုဆောင်းသည့်နေ့တွင် အရွက်အစိုဓာတ်ကို ရှောင်ရှားရန် နမူနာမကောက်ယူမီ တစ်ရက်အလိုတွင် အပင်များကို ရေလောင်းပေးရသည်။
လိုင်းများကို ကျပန်းလုပ်ဆောင်ပြီး ထောက်ပံ့ပို့ဆောင်ရေးဆိုင်ရာ အကြောင်းပြချက်များအတွက် လိုင်း 60 တွဲဖြင့် စိုက်ပျိုးခဲ့သည်။တစ်လိုင်းစီအတွက် 'အိုး' ၃ လုံးကို တစ်လိုင်းလျှင် အစေ့ ၂ လုံးဖြင့် စိုက်ပါသည်။ယခင်အသုတ်များကို စီမံဆောင်ရွက်ပြီးသည်နှင့် ပြည်သူတစ်ရပ်လုံး အကဲဖြတ်သည့်အချိန်အထိ နောက်ဆက်တွဲအသုတ်များကို စိုက်ပျိုးခဲ့ပါသည်။MAMP နှစ်ခုစလုံးအတွက် စမ်းသပ်မှု နှစ်ခုစလုံးကို လုပ်ဆောင်ပြီး နှစ်ခုစလုံးတွင် မျိုးရိုးဗီဇများကို ပြန်လည်ကျပန်းလုပ်ဆောင်ထားသည်။
ယခင်က ဖော်ပြထားသည့်အတိုင်း ROS စစ်ဆေးမှုများကို လုပ်ဆောင်ခဲ့သည်။တိုတိုပြောရရင် တစ်ကြောင်းစီအတွက် မျိုးစေ့ခြောက်အိုးကို မတူညီတဲ့ အိုး ၃ လုံးမှာ စိုက်ထားတယ်။ရရှိလာသော ပျိုးပင်များမှ တူညီမှုပေါ်မူတည်၍ သုံးမျိုးရွေးချယ်သည်။ပုံမှန်မဟုတ်သောပုံပေါက်သော သို့မဟုတ် အများစုထက် သိသိသာသာမြင့်သော သို့မဟုတ် တိုသော ပျိုးပင်များကို အသုံးမပြုပါ။အချင်း 3 မီလီမီတာရှိသော အရွက်အချပ်လေးခုကို ကွဲပြားခြားနားသော 15 ရက်ကြာပြောင်းဖူးပင်သုံးပင်၏ 4th အရွက်၏အကျယ်ဆုံးအပိုင်းမှ ထုတ်ယူခဲ့သည်။အပင်နှစ်ပင်မှ အရွက်တစ်ချပ်နှင့် အပင်တစ်ပင်မှ အချပ်နှစ်ချပ်၊ ဒုတိယအချပ်သည် ရေထိန်းဖြစ်လာသည် (အောက်တွင်ကြည့်ပါ)။discs များကို 50 µl H20 အနက်ရောင် 96-တွင်းပန်းကန်ပြားတွင် တစ်ဦးချင်းစီ မျှောပြီး အလင်းရောင်နှင့် ထိတွေ့ခြင်းမှ ရှောင်ရှားနိုင်ရန် အလူမီနီယံ တံဆိပ်ဖြင့် အလုံပိတ်ကာ အခန်းအပူချိန်တွင် ညတွင်းချင်း သိမ်းဆည်းထားသည်။နောက်တစ်နေ့နံနက်တွင် 2 mg/ml chemiluminescent probe L-012 (Wako၊ catalog #120-04891)၊ 2 mg/ml horseradish peroxidase (Type VI-A၊ Sigma-Aldrich၊ catalog #P6782) ကို အသုံးပြု၍ တုံ့ပြန်မှုအဖြေကို လည်းကောင်း၊ Chitin 100 mg/ml သို့မဟုတ် Flg22 ၏ 2 μM။ဤတုံ့ပြန်မှုဖြေရှင်းချက်၏ 50 µl ကို ရေတွင်းလေးတွင်းမှ သုံးတွင်းသို့ ပေါင်းထည့်ခဲ့သည်။စတုတ္ထရေတွင်းသည် MAMP မပါဝင်သည့် တုံ့ပြန်မှုဖြေရှင်းချက်ဖြစ်သည့် လှောင်ပြောင်ထိန်းချုပ်မှုတစ်ခုဖြစ်သည်။ပန်းကန်ပြားတစ်ခုစီတွင် ရေသာပါဝင်သော ရေတွင်းအလွတ်လေးခုကိုလည်း ထည့်သွင်းထားသည်။
တုံ့ပြန်မှုအဖြေကို ပေါင်းထည့်ပြီးနောက်၊ SynergyTM 2 multi-detection microplate reader (BioTek) ကို 2 မိနစ်တိုင်း 1 နာရီကြာ အသုံးပြု၍ အလင်းဖြာထွက်မှုကို တိုင်းတာသည်။plate reader သည် ဤ 1 နာရီအတွင်း 2 မိနစ်တိုင်း ဖြာထွက်မှုတိုင်းတာမှုကိုခံယူသည်။ရေတွင်းတစ်ခုစီအတွက် တန်ဖိုးပေးရန်အတွက် ဖတ်ရှုမှု ၃၁ ခုစလုံး၏ ပေါင်းလဒ်ကို တွက်ချက်ထားသည်။မျိုးရိုးအမျိုးအစားတစ်ခုစီအတွက် MAMP တုံ့ပြန်မှုအတွက် ခန့်မှန်းတန်ဖိုးကို (စမ်းသပ်တွင်းသုံးတွင်း၏ ပျမ်းမျှဖြာထွက်မှုတန်ဖိုး—ပုံသဏ္ဍန်ရေတွင်းတန်ဖိုး) - ပျမ်းမျှဗလာကျင်းတန်ဖိုးကို အနုတ်လက္ခဏာအဖြစ် တွက်ချက်ထားသည်။ရေတွင်းအလွတ်တန်ဖိုးများသည် သုညနှင့် အမြဲနီးကပ်နေပါသည်။
အရွက်အချပ်များနီကိုတိယာနာ ဗန္ဓိယာနာအရည်အသွေးထိန်းချုပ်မှုရည်ရွယ်ချက်များအတွက် 96- well plate တစ်ခုစီတွင် ထိန်းချုပ်မှုအဖြစ်၊ မြင့်မားသောတုံ့ပြန်မှုဆန်သောလိုင်း (SC0003) နှင့် low responsive sorghum line (PI 6069) တို့လည်း ပါဝင်ပါသည်။
B. Cookeiinoculum ပြင်ဆင်မှုနှင့် inoculation
B. Cookeiinoculum ကိုယခင်ဖော်ပြခဲ့သည့်အတိုင်းပြင်ဆင်ခဲ့သည်။အတိုချုပ်အားဖြင့်၊ ဂျုံစေ့များကို သုံးရက်ကြာ ရေစိမ်ပြီး ရေဆေးချကာ 1L conical ပုလင်းများထဲသို့ ကောက်နုတ်ပြီး 15psi နှင့် 121°C တွင် တစ်နာရီကြာ autoclaved ပြုလုပ်ထားသည်။ထို့နောက် အစေ့အဆန်များကို လတ်ဆတ်သော ယဉ်ကျေးမှုတစ်ခုမှ macerated mycelia 5 ml ခန့်ဖြင့် ရောစပ်ထားသည်။B. CookeiLSLP18 ကို ခွဲထုတ်ပြီး ၃ ရက်တစ်ကြိမ် အခန်းအပူချိန်တွင် ၂ ပတ်ကြာ ထားခဲ့ပြီး ပုလင်းများကို ၃ ရက်တစ်ကြိမ်လှုပ်ပေးပါ။2 ပတ်ကြာပြီးနောက်၊ ပိုးဝင်သော မှိုစပါးစေ့များကို လေအခြောက်ခံပြီး 4°C တွင် လယ်ကွင်းများပေါက်သည်အထိ သိမ်းဆည်းပါ။တူညီသော inoculum ကို စမ်းသပ်မှုတစ်ခုလုံးအတွက် အသုံးပြုပြီး နှစ်တိုင်း လတ်ဆတ်စေသည်။ပိုးဝင်သော အစေ့အဆန် 6-10 စေ့ကို 4-5 ပတ်သားရှိသော ပြောင်းဖူးပင်များ၏ ဗွေထဲသို့ ထည့်ထားသည်။ထိုမှိုများမှထွက်လာသော ပိုးမွှားများသည် တစ်ပတ်အတွင်း ဂျုံပင်ငယ်များတွင် စတင်ကူးစက်လာသည်။
မျိုးစေ့ပြင်ဆင်မှု
လယ်ကွင်းတွင် မစိုက်ပျိုးမီတွင် မှိုသတ်ဆေး၊ ပိုးသတ်ဆေးနှင့် ပိုးသတ်ဆေး ~ 1% Spirato 480 FS မှိုသတ်ဆေး၊ 4% Sebring 480 FS မှိုသတ်ဆေး၊ 3% Sorpro 940 ES မှိုသတ်ဆေး 3% ပါဝင်သော ဘေးကင်းသော အရောအနှောဖြင့် ကုသခဲ့ပါသည်။ထို့နောက် အစေ့များကို ၃ ရက်ကြာ လေအခြောက်ခံကာ အစေ့တစ်ဝိုက်တွင် ရောနှောထားသော အလွှာပါးလေးများ ပေးဆောင်သည်။အန္တရာယ်ကင်းသည့်သူက ပေါင်းသတ်ဆေး Dual Magnum ကို မပေါ်ပေါက်မီ ကုသမှုအဖြစ် ခွင့်ပြုထားသည်။
Target Leaf Spot resistance ကို အကဲဖြတ်ခြင်း။
SCP ကို Clayton, NC ရှိ Central Crops Research Station တွင် ဇွန်လ 14-15 ရက် 2017 ခုနှစ် နှင့် 2018 ခုနှစ် ဇွန်လ 20 ရက်နေ့တို့တွင် စမ်းသပ်မှု ပွားများမှု နှစ်ခုပါရှိသော ကျပန်း ပြီးပြည့်စုံသော ဘလောက်ဒီဇိုင်းဖြင့် စိုက်ပျိုးခဲ့ပါသည်။စမ်းသပ်မှုများအား တစ်ကွက်လျှင် အစေ့ ၁၀ စေ့အသုံးပြု၍ အတန်းအကျယ် ၀.၉ မီတာဖြင့် ၁.၈ မီတာ အတန်းတစ်တန်းတွင် စမ်းသပ်စိုက်ပျိုးခဲ့ပါသည်။အနားသတ်သက်ရောက်မှုများကို ကာကွယ်ရန် စမ်းသပ်မှုတစ်ခုစီ၏ အစွန်းတစ်ဝိုက်တွင် နယ်နိမိတ်အတန်းနှစ်ခုကို စိုက်ထားသည်။စမ်းသပ်မှုများကို 2017 ခုနှစ် ဇူလိုင်လ 20 ရက်နေ့နှင့် 2018 ခုနှစ် ဇူလိုင်လ 20 ရက်နေ့တို့တွင် စိုက်ပျိုးခဲ့ပြီး စပါးပင်များ ကြီးထွားမှု အဆင့် 3 တွင် ရှိနေပါသည်။ ရောဂါလက္ခဏာမပြသော အပင်များကို ကိုးတန်းနှင့် လုံး၀ အဆင့်သတ်မှတ်ပေးပါသည်။ အသေအပင်များကို တစ်ပင်အဖြစ် သတ်မှတ်ခဲ့သည်။2017 ခုနှစ်တွင် အဆင့်သတ်မှတ်ချက် နှစ်ခုကို ကောက်ယူခဲ့ပြီး နှစ်စဉ် inoculation နှစ်ပတ်အကြာတွင် 2018 ခုနှစ်တွင် လေးကြိမ် ပြုလုပ်ခဲ့ပါသည်။sAUDPC (ရောဂါတိုးတက်မှုမျဉ်းကွေးအောက်တွင် စံသတ်မှတ်ထားသောဧရိယာ) ကို ယခင်က ဖော်ပြထားသည့်အတိုင်း တွက်ချက်ခဲ့သည်။
ပို့စ်အချိန်- ဧပြီလ 01-2021