ဤလေ့လာမှုတွင် ပေါင်းစပ်ကုသမှု၏ လှုံ့ဆော်မှုဆိုင်ရာ အကျိုးသက်ရောက်မှုများအပင်ကြီးထွားမှု ထိန်းညှိပေးသည့်ပစ္စည်းများ(2,4-D နှင့် kinetin) နှင့် သံအောက်ဆိုဒ် နာနိုအမှုန်များ (Fe₃O₄-NPs) တို့ကို *Hypericum perforatum* L. တွင် in vitro morphogenesis နှင့် secondary metabolite ထုတ်လုပ်မှုတို့အပေါ် စုံစမ်းစစ်ဆေးခဲ့သည်။ အကောင်းဆုံးဖြစ်အောင် ပြုလုပ်ထားသော ကုသမှု [2,4-D (0.5 mg/L) + kinetin (2 mg/L) + Fe₃O₄-NPs (4 mg/L)] သည် အပင်ကြီးထွားမှု ကန့်သတ်ချက်များကို သိသိသာသာ တိုးတက်ကောင်းမွန်စေခဲ့သည်- ထိန်းချုပ်အုပ်စုနှင့် နှိုင်းယှဉ်ပါက အပင်အမြင့် 59.6% တိုးလာခြင်း၊ အမြစ်အရှည် 114.0%၊ အဖူးအရေအတွက် 180.0% နှင့် callus fresh weight 198.3% တိုးလာခြင်းတို့ ဖြစ်သည်။ ဤပေါင်းစပ်ကုသမှုသည် ပြန်လည်ရှင်သန်မှုစွမ်းဆောင်ရည် (50.85%) နှင့် hypericin ပါဝင်မှုကို 66.6% တိုးလာစေခဲ့သည်။ GC-MS ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုအရ hyperoside၊ β-patholene နှင့် cetyl alcohol တို့ မြင့်မားစွာပါဝင်နေပြီး စုစုပေါင်း အထွတ်အထိပ်ဧရိယာ၏ 93.36% ရှိပြီး စုစုပေါင်း ဖီနောလစ်နှင့် flavonoids ပါဝင်မှုမှာ 80.1% အထိ မြင့်တက်လာကြောင်း တွေ့ရှိရသည်။ ဤရလဒ်များက အပင်ကြီးထွားမှု ထိန်းညှိပေးသည့်ပစ္စည်းများ (PGRs) နှင့် Fe₃O₄ နာနိုအမှုန်များ (Fe₃O₄-NPs) သည် ဇီဝဖြစ်စဉ်ဆိုင်ရာ ဒြပ်ပေါင်းများ စုပုံလာခြင်းနှင့် ဇီဝတက်ကြွသော ဒြပ်ပေါင်းများ စုပုံလာခြင်းကို လှုံ့ဆော်ပေးခြင်းဖြင့် ပေါင်းစပ်အကျိုးသက်ရောက်မှုရှိကြောင်း ညွှန်ပြနေပြီး ၎င်းသည် ဆေးဖက်ဝင်အပင်များ၏ ဇီဝနည်းပညာ တိုးတက်မှုအတွက် အလားအလာကောင်းသော ဗျူဟာတစ်ခုကို ကိုယ်စားပြုသည်။
St. John's wort (Hypericum perforatum L.) ကို St. John's wort အဖြစ်လည်း လူသိများပြီး Hypericaceae မျိုးရင်းဝင် နှစ်ရှည်ခံ herbaceous အပင်တစ်မျိုးဖြစ်ပြီး စီးပွားရေးအရ တန်ဖိုးရှိသည်။[1] ၎င်း၏ အလားအလာရှိသော ဇီဝတက်ကြွ အစိတ်အပိုင်းများတွင် သဘာဝ tannins၊ xanthones၊ phloroglucinol၊ naphthalenedianthrone (hyperin နှင့် pseudohyperin)၊ flavonoids၊ phenolic acids နှင့် essential oils များ ပါဝင်သည်။[2,3,4] St. John's wort ကို ရိုးရာနည်းလမ်းများဖြင့် မျိုးပွားနိုင်သည်။ သို့သော် ရိုးရာနည်းလမ်းများ၏ ရာသီအလိုက်ဖြစ်ပေါ်မှု၊ မျိုးစေ့အပင်ပေါက်နှုန်း နည်းပါးခြင်းနှင့် ရောဂါများ အလွယ်တကူ ကူးစက်နိုင်ခြင်းတို့ကြောင့် ကြီးမားသော စိုက်ပျိုးမှုနှင့် ဒုတိယဇီဝဖြစ်စဉ်များ စဉ်ဆက်မပြတ် ဖွဲ့စည်းနိုင်မှု အလားအလာကို ကန့်သတ်ထားသည်။[1,5,6]
ထို့ကြောင့်၊ in vitro တစ်ရှူးမွေးမြူခြင်းသည် အပင်များကို လျင်မြန်စွာ မျိုးပွားစေရန်၊ မျိုးပွားဗီဇအရင်းအမြစ်များကို ထိန်းသိမ်းရန်နှင့် ဆေးဖက်ဝင်ဒြပ်ပေါင်းများ၏ အထွက်နှုန်းကို တိုးမြှင့်ရန်အတွက် ထိရောက်သောနည်းလမ်းတစ်ခုအဖြစ် သတ်မှတ်ခံထားရသည် [7၊ 8]။ အပင်ကြီးထွားမှု ထိန်းညှိပေးသည့်ပစ္စည်းများ (PGRs) သည် morphogenesis ကို ထိန်းညှိရာတွင် အရေးပါသောအခန်းကဏ္ဍမှ ပါဝင်ပြီး callus နှင့် သက်ရှိတစ်ခုလုံးကို in vitro စိုက်ပျိုးရန်အတွက် လိုအပ်ပါသည်။ ၎င်းတို့၏ အာရုံစူးစိုက်မှုနှင့် ပေါင်းစပ်မှုများကို အကောင်းဆုံးဖြစ်အောင်ပြုလုပ်ခြင်းသည် ဤဖွံ့ဖြိုးမှုလုပ်ငန်းစဉ်များ အောင်မြင်စွာပြီးမြောက်ရန်အတွက် အရေးကြီးပါသည် [9]။ ထို့ကြောင့်၊ St. John's wort (H. perforatum) ၏ ကြီးထွားမှုနှင့် ပြန်လည်ရှင်သန်နိုင်စွမ်းကို မြှင့်တင်ရန်အတွက် ထိန်းညှိပေးသည့်ပစ္စည်းများ၏ သင့်လျော်သော ဖွဲ့စည်းမှုနှင့် အာရုံစူးစိုက်မှုကို နားလည်ခြင်းသည် အရေးကြီးပါသည် [10]။
သံအောက်ဆိုဒ် နာနိုအမှုန်များ (Fe₃O₄) သည် တစ်ရှူးမွေးမြူရေးအတွက် တီထွင်ထုတ်လုပ်ခဲ့သော သို့မဟုတ် တီထွင်ထုတ်လုပ်နေဆဲဖြစ်သော နာနိုအမှုန်အမျိုးအစားတစ်ခုဖြစ်သည်။ Fe₃O₄ တွင် သိသာထင်ရှားသော သံလိုက်ဂုဏ်သတ္တိများ၊ ဇီဝလိုက်ဖက်ညီမှုကောင်းမွန်ခြင်းနှင့် အပင်ကြီးထွားမှုကို မြှင့်တင်ပေးနိုင်ခြင်းနှင့် ပတ်ဝန်းကျင်ဆိုင်ရာဖိစီးမှုကို လျှော့ချပေးနိုင်ခြင်းစသည့် စွမ်းရည်များပါဝင်သောကြောင့် တစ်ရှူးမွေးမြူရေးဒီဇိုင်းများတွင် သိသာထင်ရှားသော အာရုံစိုက်မှုကို ရရှိခဲ့သည်။ ဤနာနိုအမှုန်များ၏ အလားအလာရှိသော အသုံးချမှုများတွင် ဆဲလ်ကွဲပွားမှုကို မြှင့်တင်ရန်၊ အာဟာရစုပ်ယူမှုကို တိုးတက်ကောင်းမွန်စေရန်နှင့် antioxidant အင်ဇိုင်းများကို အသက်ဝင်စေရန် in vitro မွေးမြူရေးကို အကောင်းဆုံးဖြစ်အောင် လုပ်ဆောင်ခြင်း ပါဝင်နိုင်သည် [11]။
နာနိုအမှုန်များသည် အပင်ကြီးထွားမှုအပေါ် ကောင်းမွန်သော မြှင့်တင်ပေးသည့် အာနိသင်များကို ပြသခဲ့သော်လည်း၊ *H. perforatum* တွင် Fe₃O₄ နာနိုအမှုန်များနှင့် အကောင်းဆုံးဖြစ်အောင်ပြုလုပ်ထားသော အပင်ကြီးထွားမှုထိန်းညှိပေးသည့်ပစ္စည်းများကို ပေါင်းစပ်အသုံးပြုခြင်းဆိုင်ရာ လေ့လာမှုများသည် ရှားပါးနေဆဲဖြစ်သည်။ ဤအသိပညာကွာဟချက်ကို ဖြည့်ဆည်းရန်အတွက်၊ ဤလေ့လာမှုသည် ဆေးဖက်ဝင်အပင်များ၏ ဝိသေသလက္ခဏာများကို တိုးတက်ကောင်းမွန်စေရန်အတွက် အသိအမြင်အသစ်များ ပေးစွမ်းရန်အတွက် in vitro morphogenesis နှင့် ဒုတိယဇီဝဖြစ်စဉ်ထုတ်လုပ်မှုအပေါ် ၎င်းတို့၏ပေါင်းစပ်အာနိသင်များ၏ အာနိသင်များကို အကဲဖြတ်ခဲ့သည်။ ထို့ကြောင့်၊ ဤလေ့လာမှုတွင် ရည်ရွယ်ချက်နှစ်ခုရှိသည်- (၁) callus ဖွဲ့စည်းမှု၊ အညွန့်ပြန်လည်ရှင်သန်မှုနှင့် in vitro တွင် rooting ကို ထိရောက်စွာမြှင့်တင်ရန် အပင်ကြီးထွားမှုထိန်းညှိပေးသည့်ပစ္စည်းများ၏ ပါဝင်မှုကို အကောင်းဆုံးဖြစ်အောင်ပြုလုပ်ခြင်း၊ နှင့် (၂) in vitro တွင် Fe₃O₄ နာနိုအမှုန်များ၏ ကြီးထွားမှု parameters များအပေါ် အာနိသင်များကို အကဲဖြတ်ခြင်း။ အနာဂတ်အစီအစဉ်များတွင် acclimatization (in vitro) အတွင်း ပြန်လည်ရှင်သန်နှုန်းကို အကဲဖြတ်ခြင်းတို့ ပါဝင်သည်။ ဤလေ့လာမှု၏ရလဒ်များသည် *H. perforatum* ၏ micropropagation စွမ်းဆောင်ရည်ကို သိသိသာသာတိုးတက်ကောင်းမွန်လာစေမည်ဟု မျှော်လင့်ရပြီး ဤအရေးကြီးသော ဆေးဖက်ဝင်အပင်၏ ရေရှည်တည်တံ့သောအသုံးပြုမှုနှင့် ဇီဝနည်းပညာအသုံးချမှုများတွင် အထောက်အကူပြုမည်ဖြစ်သည်။
ဤလေ့လာမှုတွင်၊ လယ်ကွင်းတွင် စိုက်ပျိုးသော တစ်နှစ်ခံ St. John's wort အပင်များ (မိခင်အပင်များ) မှ အရွက်ထုတ်ယူမှုများကို ကျွန်ုပ်တို့ ရယူခဲ့ပါသည်။ ဤထုတ်ယူမှုများကို in vitro ယဉ်ကျေးမှုအခြေအနေများကို အကောင်းဆုံးဖြစ်စေရန် အသုံးပြုခဲ့ပါသည်။ မွေးမြူခြင်းမပြုမီ၊ အရွက်များကို စီးဆင်းနေသော ပေါင်းခံရေအောက်တွင် မိနစ်အနည်းငယ်ကြာ သေချာစွာဆေးကြောခဲ့သည်။ ထို့နောက် ထုတ်ယူထားသော မျက်နှာပြင်များကို အီသနော ၇၀% တွင် ၃၀ စက္ကန့်ကြာ နှစ်မြှုပ်ပြီးနောက် Tween 20 အစက်အနည်းငယ်ပါဝင်သော ၁.၅% ဆိုဒီယမ် ဟိုက်ပိုကလိုရိုက် (NaOCl) ပျော်ရည်တွင် ၁၀ မိနစ်ခန့် နှစ်မြှုပ်ခြင်းဖြင့် ပိုးသတ်ခဲ့သည်။ နောက်ဆုံးတွင်၊ ထုတ်ယူထားသော အပင်များကို နောက်ယဉ်ကျေးမှုအလတ်စားသို့ လွှဲပြောင်းခြင်းမပြုမီ ပိုးသတ်ထားသော ပေါင်းခံရေဖြင့် သုံးကြိမ်ဆေးကြောခဲ့သည်။
နောက်လေးပတ်အတွင်း၊ အပင်ပေါက်နှုန်း၊ ပျိုးပင်တစ်ပင်လျှင် အပင်ပေါက်အရေအတွက်နှင့် အပင်ပေါက်အရှည်အပါအဝင် အပင်ပေါက်ပြန်လည်ရှင်သန်မှု ကန့်သတ်ချက်များကို တိုင်းတာခဲ့သည်။ ပြန်လည်ရှင်သန်လာသော အပင်ပေါက်များသည် အနည်းဆုံး ၂ စင်တီမီတာအရှည်သို့ ရောက်ရှိသောအခါ၊ ၎င်းတို့ကို half-strength MS medium၊ 0.5 mg/L indolebutyric acid (IBA) နှင့် 0.3% guar gum တို့ပါဝင်သော အမြစ်ထွက်ပစ္စည်းထဲသို့ လွှဲပြောင်းပေးခဲ့သည်။ အမြစ်ထွက်နှုန်း၊ အမြစ်အရေအတွက်နှင့် အမြစ်အရှည်တို့ကို သုံးပတ်ကြာ ဆက်လက်စိုက်ပျိုးခဲ့ပြီး၊ ကုသမှုတစ်ခုစီကို သုံးကြိမ်ပြုလုပ်ခဲ့ပြီး၊ အပင်ပေါက် ၁၀ ပင်ကို တစ်ကြိမ်စိုက်ပျိုးခဲ့ပြီး၊ ကုသမှုတစ်ခုလျှင် အပင်ပေါက် ၃၀ ခန့် ရရှိခဲ့သည်။
အပင်၏အောက်ခြေမှ အမြင့်ဆုံးအရွက်၏အဖျားအထိ ပေတံကို အသုံးပြု၍ အပင်၏အမြင့်ကို စင်တီမီတာ (cm) ဖြင့် တိုင်းတာခဲ့သည်။ ပျိုးပင်များကို ဂရုတစိုက်ဖယ်ရှားပြီး ကြီးထွားသည့်ကြားခံကို ဖယ်ရှားပြီးနောက် အမြစ်အရှည်ကို မီလီမီတာ (mm) ဖြင့် တိုင်းတာခဲ့သည်။ စိုက်ပျိုးပင်တစ်ပင်လျှင် အဖူးအရေအတွက်ကို အပင်တစ်ပင်ချင်းစီတွင် တိုက်ရိုက်ရေတွက်ခဲ့သည်။ အရွက်များပေါ်ရှိ အဖုများဟုလူသိများသော အနက်ရောင်အစက်အပြောက်အရေအတွက်ကို မျက်မြင်အားဖြင့် တိုင်းတာခဲ့သည်။ ဤအနက်ရောင်အဖုများသည် hypericin သို့မဟုတ် oxidative အစက်အပြောက်များပါရှိသော ဂလင်းများဖြစ်သည်ဟု ယုံကြည်ရပြီး အပင်၏ ကုသမှုအပေါ် တုံ့ပြန်မှု၏ ဇီဝကမ္မဗေဒဆိုင်ရာ အညွှန်းကိန်းအဖြစ် အသုံးပြုသည်။ ကြီးထွားသည့်ကြားခံအားလုံးကို ဖယ်ရှားပြီးနောက် ပျိုးပင်များ၏ လတ်ဆတ်သောအလေးချိန်ကို မီလီဂရမ် (mg) တိကျမှုရှိသော အီလက်ထရွန်းနစ်စကေးကို အသုံးပြု၍ တိုင်းတာခဲ့သည်။
ကလာ့စ်ဖွဲ့စည်းမှုနှုန်းကို တွက်ချက်သည့်နည်းလမ်းမှာ အောက်ပါအတိုင်းဖြစ်သည်- ကြီးထွားမှုထိန်းညှိပေးသည့် အမျိုးမျိုးသောပစ္စည်းများ (kinases၊ 2,4-D နှင့် Fe3O4) ပါ၀င်သည့် အလတ်စားတစ်ခုတွင် လေးပတ်ကြာ စိုက်ပျိုးပြီးနောက် ကလာ့စ်ဖွဲ့စည်းနိုင်သော ကလာ့စ်အရေအတွက်ကို ရေတွက်သည်။ ကလာ့စ်ဖွဲ့စည်းမှုနှုန်းကို တွက်ချက်သည့် ဖော်မြူလာမှာ အောက်ပါအတိုင်းဖြစ်သည်-
ကုသမှုတစ်ခုစီကို သုံးကြိမ်ပြန်လုပ်ခဲ့ပြီး၊ ထပ်ခါတလဲလဲလုပ်ဆောင်တိုင်း အနည်းဆုံး အပင် ၁၀ ပင်ကို စစ်ဆေးခဲ့သည်။
ပြန်လည်ပေါက်ဖွားနှုန်းသည် callus ဖွဲ့စည်းခြင်းအဆင့်ပြီးနောက် အဖူးခွဲခြားခြင်းလုပ်ငန်းစဉ်ကို အောင်မြင်စွာပြီးမြောက်စေသော callus တစ်ရှူးအချိုးအစားကို ထင်ဟပ်စေသည်။ ဤအညွှန်းကိန်းသည် callus တစ်ရှူးသည် ကွဲပြားသောတစ်ရှူးအဖြစ်သို့ပြောင်းလဲပြီး အပင်အင်္ဂါအစိတ်အပိုင်းအသစ်များအဖြစ် ကြီးထွားလာနိုင်စွမ်းကို ပြသသည်။
အမြစ်တွယ်မှုကိန်းဂဏန်းသည် အမြစ်တွယ်နိုင်သည့် အကိုင်းအခက်အရေအတွက်နှင့် အကိုင်းအခက်စုစုပေါင်းအရေအတွက်တို့၏ အချိုးဖြစ်သည်။ ဤအညွှန်းကိန်းသည် အမြစ်တွယ်မှုအဆင့်၏ အောင်မြင်မှုကို ထင်ဟပ်စေပြီး ၎င်းသည် အဏုကြည့်မျိုးပွားခြင်းနှင့် အပင်ပွားခြင်းတွင် အလွန်အရေးကြီးပါသည်၊ အဘယ်ကြောင့်ဆိုသော် ကောင်းမွန်သော အမြစ်တွယ်မှုသည် ပျိုးပင်များကို ကြီးထွားမှုအခြေအနေများတွင် ပိုမိုကောင်းမွန်စွာ ရှင်သန်နိုင်စေရန် ကူညီပေးသောကြောင့်ဖြစ်သည်။
ဟိုက်ပါစင်ဒြပ်ပေါင်းများကို မီသနော 90% ဖြင့် ထုတ်ယူခဲ့သည်။ အခြောက်ခံထားသော အပင်ပစ္စည်း ၅၀ မီလီဂရမ်ကို မီသနော 1 ml ထဲသို့ထည့်ပြီး အခန်းအပူချိန်တွင် မှောင်နေသောနေရာ၌ 30 kHz တွင် 20 မိနစ်ကြာ အသံလှိုင်းဖြင့် သန့်စင်ပေးသည် (မော်ဒယ် A5120-3YJ)။ အသံလှိုင်းဖြင့် ခွဲထုတ်ပြီးနောက် နမူနာကို 6000 rpm တွင် 15 မိနစ်ကြာ ဗဟိုခွာခဲ့သည်။ အပေါ်ယံအရည်ကို စုဆောင်းခဲ့ပြီး ဟိုက်ပါစင်၏ စုပ်ယူမှုကို Conceiçao et al. [14] မှဖော်ပြထားသော နည်းလမ်းအရ Plus-3000 S spectrophotometer ကို အသုံးပြု၍ 592 nm တွင် တိုင်းတာခဲ့သည်။
အပင်ကြီးထွားမှု ထိန်းညှိပေးသည့်ပစ္စည်းများ (PGRs) နှင့် သံအောက်ဆိုဒ် နာနိုအမှုန်များ (Fe₃O₄-NPs) ဖြင့် ကုသမှုအများစုသည် ပြန်လည်ပေါက်လာသော အရွက်များတွင် အနက်ရောင်အဖုများ ဖြစ်ပေါ်ခြင်း မရှိပါ။ 2,4-D၊ 0.5 သို့မဟုတ် 1 mg/L kinetin သို့မဟုတ် 1, 2 သို့မဟုတ် 4 mg/L သံအောက်ဆိုဒ် နာနိုအမှုန်များပါဝင်သော ကုသမှုများတွင် မည်သည့်အဖုများကိုမျှ မတွေ့ရှိရပါ။ 2,4-D (0.5–2 mg/L) နှင့် kinetin (1–1.5 mg/L) နှင့် သံအောက်ဆိုဒ် နာနိုအမှုန်များ (2–4 mg/L) တို့ကို ပေါင်းစပ်ခြင်းကဲ့သို့သော ပေါင်းစပ်မှုအနည်းငယ်တွင် အဖုဖွံ့ဖြိုးမှု အနည်းငယ်တိုးလာသည်ကို ပြသခဲ့သည် (သို့သော် စာရင်းအင်းအရ သိသာထင်ရှားမှု မရှိပါ)။ ဤရလဒ်များကို ပုံ ၂ တွင် ပြသထားသည်။ အနက်ရောင်အဖုများသည် သဘာဝအတိုင်း ဖြစ်ပေါ်လာပြီး အကျိုးပြုသည့် hypericin ကြွယ်ဝသော ဂလင်းများကို ကိုယ်စားပြုသည်။ ဤလေ့လာမှုတွင် အနက်ရောင်အဖုများသည် တစ်ရှူးများ အညိုရောင်ပြောင်းခြင်းနှင့် အဓိကအားဖြင့် ဆက်စပ်နေပြီး hypericin စုပုံခြင်းအတွက် ကောင်းမွန်သောပတ်ဝန်းကျင်ကို ညွှန်ပြနေသည်။ 2,4-D၊ kinetin နှင့် Fe₃O₄ နာနိုအမှုန်များဖြင့် ကုသခြင်းသည် callus ကြီးထွားမှု၊ အညိုရောင်ပြောင်းခြင်း လျော့နည်းခြင်းနှင့် ကလိုရိုဖီးလ်ပါဝင်မှု တိုးလာခြင်းကို မြှင့်တင်ပေးပြီး ဇီဝဖြစ်စဉ်လုပ်ဆောင်ချက် တိုးတက်ကောင်းမွန်လာခြင်းနှင့် အောက်ဆီဒေးရှင်းပျက်စီးမှု လျော့ကျနိုင်ခြေကို အကြံပြုထားသည် [37]။ ဤလေ့လာမှုသည် kinetin ၏ 2,4-D နှင့် Fe₃O₄ နာနိုအမှုန်များနှင့် ပေါင်းစပ်အသုံးပြုခြင်းသည် St. John's wort callus ၏ ကြီးထွားမှုနှင့် ဖွံ့ဖြိုးတိုးတက်မှုအပေါ် အကျိုးသက်ရောက်မှုများကို အကဲဖြတ်ခဲ့သည် (ပုံ 3a–g)။ ယခင်လေ့လာမှုများအရ Fe₃O₄ နာနိုအမှုန်များသည် မှိုပိုးသတ်ဆေးနှင့် အဏုဇီဝပိုးမွှားတိုက်ဖျက်ဆေး လုပ်ဆောင်ချက်များရှိကြောင်း ပြသထားသည် [38၊ 39] နှင့် အပင်ကြီးထွားမှု ထိန်းညှိပေးသည့်ပစ္စည်းများနှင့် ပေါင်းစပ်အသုံးပြုသောအခါ အပင်ကာကွယ်ရေးယန္တရားများကို လှုံ့ဆော်ပေးနိုင်ပြီး ဆဲလ်ဖိစီးမှုညွှန်းကိန်းများကို လျှော့ချပေးနိုင်ကြောင်း ပြသထားသည် [18]။ ဒုတိယဇီဝဖြစ်စဉ်ပစ္စည်းများ၏ ဇီဝပေါင်းစပ်မှုကို မျိုးရိုးဗီဇအရ ထိန်းညှိထားသော်လည်း ၎င်းတို့၏ အမှန်တကယ်ထွက်နှုန်းသည် ပတ်ဝန်းကျင်အခြေအနေများပေါ်တွင် များစွာမူတည်သည်။ ဇီဝဖြစ်စဉ်နှင့် မော်ဖိုလောဂျီဆိုင်ရာ ပြောင်းလဲမှုများသည် သီးခြားအပင်မျိုးရိုးဗီဇများ၏ ဖော်ပြမှုကို ထိန်းညှိခြင်းနှင့် ပတ်ဝန်းကျင်ဆိုင်ရာအချက်များကို တုံ့ပြန်ခြင်းဖြင့် ဒုတိယဇီဝဖြစ်စဉ်အဆင့်များကို လွှမ်းမိုးနိုင်သည်။ ထို့အပြင်၊ inducers များသည် မျိုးဗီဇအသစ်များ၏ activation ကို လှုံ့ဆော်ပေးနိုင်ပြီး ၎င်းသည် enzymatic activity ကို လှုံ့ဆော်ပေးကာ နောက်ဆုံးတွင် biosynthetic pathways များစွာကို activate လုပ်ကာ secondary metabolites များဖွဲ့စည်းခြင်းကို ဦးတည်စေသည်။ ထို့အပြင်၊ အခြားလေ့လာမှုတစ်ခုအရ အရိပ်လျှော့ချခြင်းသည် နေရောင်ခြည်ထိတွေ့မှုကို တိုးမြင့်စေပြီး *Hypericum perforatum* ၏ သဘာဝနေရင်းဒေသတွင် နေ့အပူချိန်များကို မြင့်တက်စေပြီး hypericin ထွက်ရှိမှုကိုလည်း တိုးမြင့်စေကြောင်း ပြသခဲ့သည်။ ဤဒေတာများအပေါ်အခြေခံ၍ ဤလေ့လာမှုသည် တစ်ရှူးယဉ်ကျေးမှုတွင် အလားအလာရှိသော inducers အဖြစ် သံ nanoparticles များ၏ အခန်းကဏ္ဍကို စုံစမ်းစစ်ဆေးခဲ့သည်။ ရလဒ်များအရ ဤ nanoparticles များသည် enzymatic stimulation မှတစ်ဆင့် hesperidin ဇီဝပေါင်းစပ်မှုတွင်ပါဝင်သော မျိုးဗီဇများကို activate လုပ်နိုင်ပြီး ဤဒြပ်ပေါင်း စုပုံလာစေကြောင်း ပြသခဲ့သည် (ပုံ ၂)။ ထို့ကြောင့် သဘာဝအခြေအနေများတွင် ကြီးထွားလာသော အပင်များနှင့် နှိုင်းယှဉ်ပါက၊ အလယ်အလတ်ဖိစီးမှုကို secondary metabolites များ၏ ဇီဝပေါင်းစပ်မှုတွင်ပါဝင်သော မျိုးဗီဇများကို activate လုပ်ခြင်းနှင့် ပေါင်းစပ်လိုက်သောအခါ in vivo တွင် ထိုကဲ့သို့သော ဒြပ်ပေါင်းများ ထုတ်လုပ်မှုကိုလည်း မြှင့်တင်ပေးနိုင်သည်ဟု ငြင်းခုံနိုင်သည်။ ပေါင်းစပ်ကုသမှုများသည် ယေဘုယျအားဖြင့် ပြန်လည်ရှင်သန်မှုနှုန်းအပေါ် အပြုသဘောဆောင်သော အကျိုးသက်ရောက်မှုရှိသော်လည်း အချို့ကိစ္စများတွင် ဤအကျိုးသက်ရောက်မှု အားနည်းသွားသည်။ ထူးခြားသည်မှာ 1 mg/L 2,4-D၊ 1.5 mg/L kinase နှင့် မတူညီသော ပြင်းအားများဖြင့် ကုသခြင်းသည် ထိန်းချုပ်အုပ်စုနှင့် နှိုင်းယှဉ်ပါက ပြန်လည်ဖြစ်ပေါ်မှုနှုန်းကို 50.85% သီးခြားစီ သိသိသာသာ မြှင့်တင်ပေးနိုင်သည် (ပုံ 4c)။ ဤရလဒ်များက နာနိုဟော်မုန်းများ၏ သီးခြားပေါင်းစပ်မှုများသည် အပင်ကြီးထွားမှုနှင့် ဇီဝဖြစ်စဉ်ထုတ်လုပ်မှုကို မြှင့်တင်ရန် ပေါင်းစပ်လုပ်ဆောင်နိုင်ကြောင်း အကြံပြုထားပြီး ၎င်းသည် ဆေးဖက်ဝင်အပင်များ၏ တစ်ရှူးမွေးမြူရေးအတွက် အလွန်အရေးပါသည်။ Palmer နှင့် Keller [50] သည် 2,4-D ကုသမှုသည် St. perforatum တွင် callus ဖွဲ့စည်းမှုကို သီးခြားစီ ဖြစ်ပေါ်စေနိုင်ပြီး kinase ထည့်သွင်းခြင်းသည် callus ဖွဲ့စည်းမှုနှင့် ပြန်လည်ဖြစ်ပေါ်မှုကို သိသိသာသာ မြှင့်တင်ပေးကြောင်း ပြသခဲ့သည်။ ဤအကျိုးသက်ရောက်မှုသည် ဟော်မုန်းဟန်ချက်ညီမှု တိုးတက်လာခြင်းနှင့် ဆဲလ်ကွဲပွားမှုကို လှုံ့ဆော်ခြင်းကြောင့် ဖြစ်သည်။ Bal နှင့် အဖွဲ့ [51] သည် Fe₃O₄-NP ကုသမှုသည် antioxidant အင်ဇိုင်းများ၏ လုပ်ဆောင်ချက်ကို သီးခြားစီ မြှင့်တင်ပေးနိုင်ပြီး St. perforatum တွင် အမြစ်ကြီးထွားမှုကို မြှင့်တင်ပေးကြောင်း တွေ့ရှိခဲ့သည်။ 0.5 mg/L၊ 1 mg/L နှင့် 1.5 mg/L ပြင်းအားများတွင် Fe₃O₄ နာနိုအမှုန်များပါရှိသော ယဉ်ကျေးမှုမီဒီယာသည် နှမ်းပင်များ၏ ပြန်လည်ရှင်သန်မှုနှုန်းကို တိုးတက်စေသည် [52]။ kinetin၊ 2,4-dichlorobenzothiazolinone နှင့် Fe₃O₄ နာနိုအမှုန်များ အသုံးပြုခြင်းသည် callus နှင့် အမြစ်ဖွဲ့စည်းမှုနှုန်းကို သိသိသာသာ တိုးတက်ကောင်းမွန်စေသော်လည်း၊ in vitro ပြန်လည်ရှင်သန်မှုအတွက် ဤဟော်မုန်းများကို အသုံးပြုခြင်း၏ အလားအလာရှိသော ဘေးထွက်ဆိုးကျိုးများကို ထည့်သွင်းစဉ်းစားရန် လိုအပ်ပါသည်။ ဥပမာအားဖြင့်၊ 2,4-dichlorobenzothiazolinone သို့မဟုတ် kinetin ကို ရေရှည် သို့မဟုတ် ပြင်းအားမြင့်မားစွာ အသုံးပြုခြင်းသည် somatic clonal variation၊ oxidative stress၊ ပုံမှန်မဟုတ်သော callus morphology သို့မဟုတ် vitrification ကို ဖြစ်ပေါ်စေနိုင်သည်။ ထို့ကြောင့်၊ ပြန်လည်ရှင်သန်မှုနှုန်းမြင့်မားခြင်းသည် မျိုးရိုးဗီဇတည်ငြိမ်မှုကို ခန့်မှန်းရန် မလိုအပ်ပါ။ ပြန်လည်ရှင်သန်သော အပင်အားလုံးကို မော်လီကျူးအမှတ်အသားများ (ဥပမာ RAPD၊ ISSR၊ AFLP) သို့မဟုတ် cytogenetic analysis ကိုအသုံးပြု၍ အကဲဖြတ်သင့်သည် [53,54,55]။
ဤလေ့လာမှုသည် အပင်ကြီးထွားမှုထိန်းညှိပေးသည့်ပစ္စည်းများ (2,4-D နှင့် kinetin) ကို Fe₃O₄ နာနိုအမှုန်များနှင့် ပေါင်းစပ်အသုံးပြုခြင်းသည် *Hypericum perforatum* တွင် morphogenesis နှင့် အဓိကဇီဝတက်ကြွဇီဝဖြစ်စဉ်ပစ္စည်းများ (hypericin နှင့် hyperoside အပါအဝင်) စုဆောင်းမှုကို မြှင့်တင်ပေးနိုင်ကြောင်း ပထမဆုံးအကြိမ်အဖြစ် သရုပ်ပြခဲ့သည်။ အကောင်းဆုံးဖြစ်အောင်ပြုလုပ်ထားသော ကုသမှုအစီအစဉ် (1 mg/L 2,4-D + 1 mg/L kinetin + 4 mg/L Fe₃O₄-NPs) သည် callus ဖွဲ့စည်းမှု၊ organogenesis နှင့် ဒုတိယဇီဝဖြစ်စဉ်အထွက်နှုန်းကို အမြင့်ဆုံးဖြစ်စေရုံသာမက အပင်၏ဖိစီးမှုခံနိုင်ရည်နှင့် ဆေးဖက်ဝင်တန်ဖိုးကို တိုးတက်ကောင်းမွန်စေသည့် အပျော့စားလှုံ့ဆော်မှုအကျိုးသက်ရောက်မှုကိုလည်း ပြသခဲ့သည်။ နာနိုနည်းပညာနှင့် အပင်တစ်ရှူးယဉ်ကျေးမှုပေါင်းစပ်မှုသည် ဆေးဖက်ဝင်ဒြပ်ပေါင်းများကို in vitro တွင် ကြီးမားသောထုတ်လုပ်မှုအတွက် ရေရှည်တည်တံ့ပြီး ထိရောက်သောပလက်ဖောင်းတစ်ခုကို ပံ့ပိုးပေးသည်။ ဤရလဒ်များသည် စက်မှုလုပ်ငန်းအသုံးချမှုများနှင့် မော်လီကျူးယန္တရားများ၊ ဆေးပမာဏအကောင်းဆုံးဖြစ်အောင်ပြုလုပ်ခြင်းနှင့် မျိုးရိုးဗီဇတိကျမှုဆိုင်ရာ အနာဂတ်သုတေသနအတွက် လမ်းခင်းပေးသည်၊ ထို့ကြောင့် ဆေးဖက်ဝင်အပင်များဆိုင်ရာ အခြေခံသုတေသနကို လက်တွေ့ဇီဝနည်းပညာနှင့် ချိတ်ဆက်ပေးသည်။
ပို့စ်တင်ချိန်: ၂၀၂၅ ခုနှစ်၊ ဒီဇင်ဘာလ ၁၂ ရက်