DELLA ပရိုတိန်းများကိုထိန်းသိမ်းထားသည်။တိုးတက်မှုအားထိန်းညှိမှုများအတွင်းပိုင်းနှင့် ပြင်ပအချက်ပြမှုများကို တုံ့ပြန်ရာတွင် အပင်ဖွံ့ဖြိုးတိုးတက်မှုတွင် အဓိကအခန်းကဏ္ဍမှ ပါဝင်ပါသည်။ ကူးယူဖော်ပြခြင်းဆိုင်ရာ ထိန်းကျောင်းမှုများအနေဖြင့်၊ DELLA များသည် ၎င်းတို့၏ GRAS ဒိုမိန်းများမှတစ်ဆင့် ကူးယူဖော်ပြသည့်အချက်များ (TFs) နှင့် histone H2A တို့နှင့် ချိတ်ဆက်ကာ မြှင့်တင်သူများတွင် လုပ်ဆောင်ရန် စုဆောင်းခံရသည်။ မကြာသေးမီက လေ့လာမှုများအရ DELLA တည်ငြိမ်မှုကို အပင်ဟော်မုန်းမှ လှုံ့ဆော်ပေးသော အသွင်အပြင်ကို ယန္တရားနှစ်ခုဖြင့် ဘာသာပြန်ပြီးနောက် ထိန်းညှိထားကြောင်း၊gibberellin၎င်းတို့၏ လျင်မြန်စွာ ပျက်စီးယိုယွင်းမှုကို ဖြစ်ပေါ်စေသော၊ ၎င်းတို့၏ စုဆောင်းမှုကို တိုးလာစေသည့် အသေးစား ubiquitin-like modifier (SUMO) နှင့် ပေါင်းစပ်ခြင်း။ ထို့အပြင်၊ DELLA လုပ်ဆောင်ချက်ကို ကွဲပြားသော glycosylation ယန္တရားနှစ်ခုဖြင့် ထိန်းချုပ်ထားသည်- O-fucosylation သည် DELLA-TF အပြန်အလှန်တုံ့ပြန်မှုကို အားကောင်းစေပြီး O-linked N-acetylglucosamine (O-GlcNAc) ပြုပြင်မွမ်းမံခြင်းသည် DELLA-TF အပြန်အလှန်တုံ့ပြန်မှုကို ဟန့်တားသည်။ သို့သော်၊ အချို့က phosphorylation သည် DELLA ပျက်စီးမှုကို မြှင့်တင်ခြင်း သို့မဟုတ် ဖိနှိပ်သည်ဟု အချို့က အကြံပြုခြင်းဖြင့် ယခင်လေ့လာမှုများက ကွဲလွဲနေသောရလဒ်များကို ပြသထားသောကြောင့် DELLA phosphorylation ၏အခန်းကဏ္ဍသည် ရှင်းလင်းပြတ်သားမှုမရှိပါ။ ဤတွင်၊ ကျွန်ုပ်တို့သည် အစုလိုက်အပြုံလိုက် spectrometry ဖြင့် Arabidopsis thaliana မှ သန့်စင်ထားသော GA1-3 (RGA)၊ AtDELLA ရှိ phosphorylation sites များကို ခွဲခြားသိရှိပြီး PolyS နှင့် PolyS/T ဒေသများရှိ phosphorylation နှစ်ခု၏ RGA peptides များ၏ phosphorylation သည် PolyS နှင့် PolyS/T ဒေသများတွင် RGA လုပ်ဆောင်ချက်ကို မြှင့်တင်ပေးခြင်းဖြင့် RGA လုပ်ဆောင်ချက်ကို မြှင့်တင်ပေးပါသည်။ ထင်ရှားသည်မှာ phosphorylation သည် RGA-TF အပြန်အလှန်ဆက်သွယ်မှုများ သို့မဟုတ် RGA တည်ငြိမ်မှုကို မထိခိုက်စေပါ။ ကျွန်ုပ်တို့၏လေ့လာမှုတွင် phosphorylation သည် DELLA လုပ်ဆောင်ချက်ကို လှုံ့ဆော်ပေးသည့် မော်လီကျူးယန္တရားတစ်ခုကို ဖော်ပြသည်။
ကျွန်ုပ်တို့၏ ဒြပ်ထုခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုမှ Pep1 နှင့် Pep2 နှစ်ခုစလုံးသည် GA ချို့တဲ့သော Ga1 နောက်ခံတွင် RGA တွင် phosphorylated မြင့်မားကြောင်းပြသခဲ့သည်။ ဤလေ့လာမှုအပြင်၊ phosphoproteomic လေ့လာမှုများသည် RGA ရှိ Pep1 phosphorylation ကိုဖော်ပြခဲ့သည်၊ ၎င်း၏အခန်းကဏ္ဍကိုမလေ့လာရသေးသော်လည်း 53,54,55 ။ ဆန့်ကျင်ဘက်အားဖြင့်၊ Pep2 phosphorylation သည် ဤ peptide သည် RGAGKG transgene ကိုအသုံးပြု၍သာရှာဖွေတွေ့ရှိနိုင်သောကြောင့် ယခင်ကဖော်ပြခဲ့ခြင်းမရှိပါ။ Pep1 phosphorylation ကို ဖျက်သိမ်းသည့် m1A ဗီဇပြောင်းလဲမှုသည် အပင်တွင် RGA လုပ်ဆောင်ချက် အနည်းငယ်သာ လျော့ကျခဲ့သော်လည်း RGA လုပ်ဆောင်ချက်ကို လျှော့ချရာတွင် m2A နှင့် ပေါင်းစပ်လိုက်သောအခါတွင် ပေါင်းထည့်သည့် အကျိုးသက်ရောက်မှုရှိသည် (နောက်ဆက်တွဲ ပုံ 6)။ အရေးကြီးသည်မှာ၊ Pep1 phosphorylation သည် GA1 နှင့် နှိုင်းယှဉ်ပါက GA-မြှင့်တင်ထားသော sly1 mutant တွင် သိသိသာသာ လျော့ကျသွားပြီး GA သည် RGA dephosphorylation ကို မြှင့်တင်ပေးပြီး ၎င်း၏ လုပ်ဆောင်ချက်ကို လျှော့ချပေးသည်ဟု အကြံပြုထားသည်။ GA သည် RGA phosphorylation ကို ဖိနှိပ်သည့် ယန္တရားသည် နောက်ထပ် စုံစမ်းစစ်ဆေးမှု လိုအပ်သည်။ ဖြစ်နိုင်ခြေတစ်ခုမှာ အမည်မသိပရိုတင်း kinase ၏ စည်းမျဉ်းဖြင့် ၎င်းကို အောင်မြင်နိုင်သည် ။ လေ့လာမှုများက CK1 ပရိုတိန်း kinase EL1 ၏ဖော်ပြမှုကို GA 41 တွင် GA မှထိန်းချုပ်ထားသော်လည်း၊ ကျွန်ုပ်တို့၏ရလဒ်များအရ Arabidopsis EL1 homologue (AEL1-4) ၏အဆင့်မြင့်သောဗီဇပြောင်းလဲမှုများသည် RGA phosphorylation ကိုမလျှော့ချကြောင်းပြသထားသည်။ ကျွန်ုပ်တို့၏ရလဒ်များနှင့် သဘောတူညီချက်အရ၊ Arabidopsis AEL မျဉ်းကြောင်းများပိုလျှံနေသော AEL ကိုအသုံးပြု၍ မကြာသေးမီက phosphoproteomic လေ့လာမှုတစ်ခုနှင့် ael triple mutant သည် မည်သည့် DELLA ပရိုတိန်းများကို ဤ kinases56 ၏အလွှာအဖြစ် မခွဲခြားနိုင်ပါ။ ကျွန်ုပ်တို့သည် စာမူကိုပြင်ဆင်သောအခါ၊ GSK3၊ ဂျုံတွင်ရှိသော GSK3/SHAGGY-like kinase ကဲ့သို့သော kinase ဗီဇသည် phosphorylate DELLA (Rht-B1b)57 သည် Rht-B1b ၏ GSK3 ၏ phosphorylation ကိုအတည်မပြုရသေးသော်လည်း အပင်တွင် phosphorylate DELLA (Rht-B1b)57 ရှိကြောင်း အစီရင်ခံခဲ့ပါသည်။ GSK3 ၏ရှေ့မှောက်တွင် ဗီတိုအင်ဇိုင်းတုံ့ပြန်မှုများသည် ဒြပ်ထုခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုဖြင့် Rht-B1b ၏ DELLA နှင့် GRAS ဒိုမိန်းများကြားတွင်ရှိသော phosphorylation sites သုံးခုကိုပြသခဲ့သည် (နောက်ဆက်တွဲပုံ။ 3)။ phosphorylation sites သုံးခုလုံးရှိ Serine မှ alanine အစားထိုးမှုများသည် ပြောင်းလဲထားသောဂျုံတွင် Rht-B1b လုပ်ဆောင်ချက်ကို လျော့နည်းစေသည်၊ Pep2 RGA တွင် alanine အစားထိုးမှုများသည် RGA လုပ်ဆောင်ချက်ကို လျော့နည်းစေသည်ဟူသော ကျွန်ုပ်တို့၏တွေ့ရှိချက်များနှင့်အညီ၊ သို့သော်၊ in vitro ပရိုတိန်းပျက်စီးခြင်းဆိုင်ရာ စစ်ဆေးမှုများက phosphorylation သည် Rht-B1b57 ကို တည်ငြိမ်စေနိုင်ကြောင်း ထပ်လောင်းပြသခဲ့သည်။ Pep2 RGA တွင် အလန်နင်းအစားထိုးမှုများသည် အပင်၏တည်ငြိမ်မှုကို မပြောင်းလဲစေကြောင်းပြသသည့် ကျွန်ုပ်တို့၏ရလဒ်များနှင့် ဆန့်ကျင်ဘက်ဖြစ်သည်။ ဂျုံတွင် GSK3 သည် Arabidopsis 57 ရှိ brassinosteroid-အာရုံမခံသော ပရိုတင်း 2 (BIN2) ၏ အစိတ်အပိုင်းတစ်ခုဖြစ်သည်။ BIN2 သည် BR အချက်ပြခြင်း၏ အနုတ်လက္ခဏာထိန်းညှိပေးသည့်စနစ်ဖြစ်ပြီး BR သည် BIN2 ပျက်ဆီးခြင်း 58 ကိုဖြစ်ပေါ်စေခြင်းဖြင့် ၎င်း၏အချက်ပြလမ်းကြောင်းကို အသက်ဝင်စေပါသည်။ BR ကုသမှုသည် RGA တည်ငြိမ်မှု 59 Arabpholementation အဆင့်များ သို့မဟုတ် photosigures များကို မလျှော့ချကြောင်းပြသခဲ့သည် 2) RGA သည် BIN2 ဖြင့် phosphorylated မဖြစ်နိုင်ကြောင်း အကြံပြုသည်။
ကိန်းဂဏန်းအချက်အလက်အားလုံးကို Excel ကိုအသုံးပြု၍ ကိန်းဂဏန်းအချက်အလက်များကို ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာပြီး ကျောင်းသား၏ t-test ကိုအသုံးပြု၍ သိသာထင်ရှားသောကွာခြားချက်များကို ဆုံးဖြတ်ခဲ့သည်။ နမူနာအရွယ်အစားကို ကြိုတင်ဆုံးဖြတ်ရန် ကိန်းဂဏန်းနည်းလမ်းများကို အသုံးပြုထားခြင်းမရှိပါ။ မည်သည့်ဒေတာကိုမျှ ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခြင်းမှ ဖယ်ထုတ်ထားခြင်းမရှိပါ။ စမ်းသပ်မှုကို ကျပန်းမလုပ်ဆောင်ခဲ့ပါ။ နှင့် သုတေသီများသည် စမ်းသပ်မှုနှင့် ရလဒ်အကဲဖြတ်မှုအတွင်း ခွဲဝေသုံးစွဲမှုကို သိရှိခဲ့ကြသည်။ နမူနာအရွယ်အစားများကို ပုံသဏ္ဍာန်များနှင့် ဒေတာအကြမ်းဖိုင်များတွင် ပေးထားသည်။
ပို့စ်အချိန်- ဧပြီလ 15-2025