DELLA ပရိုတင်းများသည် မာစတာကို ထိန်းသိမ်းထားသည်။ကြီးထွားမှု ထိန်းညှိပေးသည့် ပစ္စည်းများအတွင်းပိုင်းနှင့် ပတ်ဝန်းကျင်ဆိုင်ရာ အချက်ပြမှုများကို တုံ့ပြန်သည့်အနေဖြင့် အပင်ဖွံ့ဖြိုးမှုကို ထိန်းချုပ်ရာတွင် အဓိကအခန်းကဏ္ဍမှ ပါဝင်ပါသည်။ DELLA သည် transcriptional regulator အဖြစ် လုပ်ဆောင်ပြီး ၎င်း၏ GRAS domain မှတစ်ဆင့် transcription factors (TFs) နှင့် histone H2A တို့နှင့် ချိတ်ဆက်ခြင်းဖြင့် promoters များကို ပစ်မှတ်ထားရန် စုဆောင်းခံရသည်။ မကြာသေးမီက လေ့လာမှုများအရ DELLA တည်ငြိမ်မှုကို post-translationally ယန္တရားနှစ်ခုမှတစ်ဆင့် ထိန်းညှိပေးကြောင်း ပြသထားသည်- ၎င်း၏ လျင်မြန်စွာ ယိုယွင်းပျက်စီးမှုကို ဦးတည်စေသော phytohormone gibberellin မှ လှုံ့ဆော်ပေးသော polyubiquitination နှင့် ၎င်း၏ စုဆောင်းမှုကို တိုးမြှင့်ရန် small ubiquitin-like modifiers (SUMO) ပေါင်းစပ်မှု။ ထို့အပြင်၊ DELLA လှုပ်ရှားမှုကို glycosylations နှစ်မျိုးဖြင့် dynamically ထိန်းညှိပေးသည်- DELLA-TF အပြန်အလှန် ဆက်သွယ်မှုသည် O-fucosylation ဖြင့် မြှင့်တင်ပေးသော်လည်း O-linked N-acetylglucosamine (O-GlcNAc) ပြုပြင်မွမ်းမံမှုဖြင့် တားဆီးထားသည်။ သို့သော်၊ DELLA phosphorylation ၏ အခန်းကဏ္ဍမှာ မရှင်းလင်းသေးပါ၊ အဘယ်ကြောင့်ဆိုသော် ယခင်လေ့လာမှုများသည် phosphorylation သည် DELLA ယိုယွင်းပျက်စီးမှုကို မြှင့်တင်ပေးသည် သို့မဟုတ် လျော့နည်းစေသည်ဟု ပြသသည့် ရလဒ်များမှသည် phosphorylation သည် ၎င်း၏ တည်ငြိမ်မှုကို မထိခိုက်ကြောင်း ပြသသည့် အခြားရလဒ်များအထိ အမျိုးမျိုးသော ပဋိပက္ခဖြစ်စေသော ရလဒ်များကို ပြသခဲ့သောကြောင့်ဖြစ်သည်။ ဤနေရာတွင် REPRESSOR တွင် phosphorylation sites များကို ဖော်ထုတ်ပါသည်ga1-3(RGA၊ AtDELLA) ကို mass spectrometry analysis ဖြင့် Arabidopsis thaliana မှ သန့်စင်ပြီး PolyS နှင့် PolyS/T ဒေသများရှိ RGA peptide နှစ်ခု၏ phosphorylation သည် H2A ချိတ်ဆက်မှုကို မြှင့်တင်ပေးပြီး RGA activity ကို မြှင့်တင်ပေးကြောင်း ပြသထားသည်။ RGA နှင့် target promoters များ ဆက်စပ်မှု။ မှတ်သားစရာကောင်းသည်မှာ phosphorylation သည် RGA-TF interaction သို့မဟုတ် RGA တည်ငြိမ်မှုကို မထိခိုက်ပါ။ ကျွန်ုပ်တို့၏ လေ့လာမှုတွင် phosphorylation သည် DELLA activity ကို ဖြစ်ပေါ်စေသည့် မော်လီကျူးယန္တရားကို ဖော်ပြသည်။
DELLA လုပ်ဆောင်ချက်ကို ထိန်းညှိရာတွင် ဖော့စဖောရီလေးရှင်း၏ အခန်းကဏ္ဍကို ရှင်းလင်းစွာဖော်ပြရန်အတွက်၊ in vivo တွင် DELLA ဖော့စဖောရီလေးရှင်းနေရာများကို ဖော်ထုတ်ပြီး အပင်များတွင် လုပ်ဆောင်ချက်ဆိုင်ရာ ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုများ ပြုလုပ်ရန် အရေးကြီးပါသည်။ အပင်ထုတ်ယူမှုများ၏ affinity purification နှင့် MS/MS analysis ဖြင့် RGA ရှိ ဖော့စဖောရီလေးရှင်း အများအပြားကို ကျွန်ုပ်တို့ ဖော်ထုတ်ခဲ့ပါသည်။ GA ချို့တဲ့မှုအခြေအနေများတွင် RHA ဖော့စဖောရီလေးရှင်း တိုးလာသော်လည်း ဖော့စဖောရီလေးရှင်းသည် ၎င်း၏တည်ငြိမ်မှုကို မထိခိုက်ပါ။ အရေးကြီးသည်မှာ co-IP နှင့် ChIP-qPCR assays များအရ RGA ၏ PolyS/T ဒေသတွင် ဖော့စဖောရီလေးရှင်းသည် H2A နှင့် ၎င်း၏ အပြန်အလှန် ဆက်သွယ်မှုနှင့် target promoters များနှင့် ၎င်း၏ ဆက်နွယ်မှုကို မြှင့်တင်ပေးပြီး ဖော့စဖောရီလေးရှင်းသည် RGA လုပ်ဆောင်ချက်ကို မည်သို့ဖြစ်ပေါ်စေသည့် ယန္တရားကို ဖော်ပြသည်။
LHR1 subdomain နှင့် TF အပြန်အလှန် ဆက်သွယ်မှုမှတစ်ဆင့် chromatin ကို ပစ်မှတ်ထားရန် RGA ကို စုဆောင်းပြီးနောက် ၎င်း၏ PolyS/T ဒေသနှင့် PFYRE subdomain မှတစ်ဆင့် H2A နှင့် ချိတ်ဆက်ကာ RGA ကို တည်ငြိမ်စေရန် H2A-RGA-TF complex ကို ဖွဲ့စည်းသည်။ DELLA domain နှင့် GRAS domain အကြားရှိ PolyS/T ဒေသရှိ Pep 2 ၏ phosphorylation သည် အမျိုးအမည်မသိ kinase တစ်ခုမှ RGA-H2A ချိတ်ဆက်မှုကို မြှင့်တင်ပေးသည်။ rgam2A mutant protein သည် RGA phosphorylation ကို ဖျက်သိမ်းပြီး H2A ချိတ်ဆက်မှုကို အနှောင့်အယှက်ဖြစ်စေရန် မတူညီသော protein conformation ကို လက်ခံသည်။ ၎င်းသည် transient TF-rgam2A အပြန်အလှန် ဆက်သွယ်မှုများကို မတည်ငြိမ်ဖြစ်စေပြီး rgam2A ကို target chromatin မှ ခွဲထွက်သွားစေသည်။ ဤပုံသည် RGA-mediated transcriptional repression ကိုသာ ဖော်ပြထားသည်။ H2A-RGA-TF complex သည် target gene transcription ကို မြှင့်တင်ပေးပြီး rgam2A ၏ dephosphorylation သည် transcription ကို လျော့ကျစေသည်မှလွဲ၍ RGA-mediated transcriptional activation အတွက် အလားတူပုံစံကို ဖော်ပြနိုင်သည်။ Huang et al.21 မှ ပြုပြင်ထားသော ပုံကိုကြည့်ပါ။
ပမာဏဆိုင်ရာဒေတာအားလုံးကို Excel ကို အသုံးပြု၍ စာရင်းအင်းနည်းဖြင့် ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခဲ့ပြီး သိသာထင်ရှားသော ကွာခြားချက်များကို Student's t test ကို အသုံးပြု၍ ဆုံးဖြတ်ခဲ့သည်။ နမူနာအရွယ်အစားကို ကနဦးဆုံးဖြတ်ရန် စာရင်းအင်းနည်းလမ်းများကို အသုံးမပြုခဲ့ပါ။ ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုမှ မည်သည့်ဒေတာကိုမျှ ချန်လှပ်ထားခြင်းမရှိပါ။ စမ်းသပ်မှုကို ကျပန်းမဟုတ်ခဲ့ပါ။ သုတေသီများသည် စမ်းသပ်မှုအတွင်း ဒေတာဖြန့်ဖြူးမှုနှင့် ရလဒ်များကို အကဲဖြတ်ခြင်းတို့ကို မျက်ကွယ်မပြုခဲ့ပါ။ နမူနာအရွယ်အစားကို ပုံအညွှန်းနှင့် ရင်းမြစ်ဒေတာဖိုင်တွင် ဖော်ပြထားသည်။
လေ့လာမှုဒီဇိုင်းနှင့်ပတ်သက်သည့် နောက်ထပ်အချက်အလက်များအတွက် ဤဆောင်းပါးနှင့်ဆက်စပ်နေသော Natural Portfolio Report Abstract ကိုကြည့်ပါ။
Mass spectrometry proteomics အချက်အလက်များကို dataset identifier PXD046004 ပါရှိသော PRIDE66 partner repository မှတစ်ဆင့် ProteomeXchange consortium သို့ ပေးပို့ထားပါသည်။ ဤလေ့လာမှုအတွင်း ရရှိသော အခြားဒေတာအားလုံးကို Supplementary Information၊ Supplementary Data Files နှင့် Raw Data Files တို့တွင် တင်ပြထားပါသည်။ ရင်းမြစ်ဒေတာကို ဤဆောင်းပါးအတွက် ပံ့ပိုးပေးထားပါသည်။
ပို့စ်တင်ချိန်: ၂၀၂၄ ခုနှစ်၊ နိုဝင်ဘာလ ၈ ရက်