ထိရောက်စွာလုပ်ဆောင်ရန်ခြင်များကို ထိန်းချုပ်ပါ၎င်းတို့သယ်ဆောင်သော ရောဂါများဖြစ်ပွားမှုကို လျှော့ချရန်နှင့် ဓာတုပိုးသတ်ဆေးများအတွက် မဟာဗျူဟာကျသော၊ ရေရှည်တည်တံ့သော နှင့် ပတ်ဝန်းကျင်နှင့် သဟဇာတဖြစ်သော အစားထိုးနည်းလမ်းများ လိုအပ်ပါသည်။ အီဂျစ် Aedes များကို ထိန်းချုပ်ရန်အသုံးပြုရန်အတွက် ဇီဝဗေဒအရ မလှုပ်ရှားသော glucosinolates များ၏ enzymatic hydrolysis မှ ထုတ်လုပ်သော အပင်မှရရှိသော isothiocyanates ၏ အရင်းအမြစ်အဖြစ် ကျွန်ုပ်တို့ အကဲဖြတ်ခဲ့ပါသည် (L., 1762)။ အဆီငါးမျိုးပါဝင်သော အစေ့မှုန့် (Brassica juncea (L) Czern., 1859, Lepidium sativum L., 1753, Sinapis alba L., 1753, Thlaspi arvense L., 1753 နှင့် Thlaspi arvense – အပူဖြင့် မလှုပ်ရှားနိုင်ခြင်းနှင့် အင်ဇိုင်းပြိုကွဲခြင်း အဓိကအမျိုးအစားသုံးမျိုး ဓာတုထုတ်ကုန်များ ၂၄ နာရီထိတွေ့မှုတွင် Aedes aegypti ပိုးလောင်းများအပေါ် allyl isothiocyanate၊ benzyl isothiocyanate နှင့် 4-hydroxybenzylisothiocyanate တို့၏ အဆိပ်သင့်မှု (LC50) ကို ဆုံးဖြတ်ရန် = 0.04 g/120 ml dH2O)။ မုန်ညင်း၊ အဖြူရောင်မုန်ညင်းနှင့် မြင်းမြီးအတွက် LC50 တန်ဖိုးများ။ မျိုးစေ့မှုန့်သည် allyl isothiocyanate (LC50 = 19.35 ppm) နှင့် နှိုင်းယှဉ်ပါက အသီးသီး 0.05၊ 0.08 နှင့် 0.05 ရှိသည်။ -Hydroxybenzylisothiocyanate (LC50 = 55.41 ppm) သည် ကုသမှုပြုလုပ်ပြီး ၂၄ နာရီအတွင်း 0.1 g/120 ml dH2O ထက် ပိုးလောင်းများအတွက် ပိုမိုအဆိပ်သင့်စေပါသည်။ ဤရလဒ်များသည် alfalfa မျိုးစေ့မှုန့်ထုတ်လုပ်မှုနှင့် ကိုက်ညီပါသည်။ benzyl esters ၏ မြင့်မားသောစွမ်းဆောင်ရည်သည် တွက်ချက်ထားသော LC50 တန်ဖိုးများနှင့် ကိုက်ညီပါသည်။ မျိုးစေ့မှုန့်ကိုအသုံးပြုခြင်းသည် ခြင်ထိန်းချုပ်ရေး၏ ထိရောက်သောနည်းလမ်းတစ်ခုကို ပေးစွမ်းနိုင်သည်။ cruciferous မျိုးစေ့မှုန့်နှင့် ၎င်း၏အဓိကဓာတုဒြပ်ပေါင်းများ၏ ခြင်ပိုးလောင်းများအပေါ် ထိရောက်မှုနှင့် cruciferous မျိုးစေ့မှုန့်ရှိ သဘာဝဒြပ်ပေါင်းများသည် ခြင်ထိန်းချုပ်ရေးအတွက် ပတ်ဝန်းကျင်နှင့်သဟဇာတဖြစ်သော ပိုးလောင်းပိုးသတ်ဆေးအဖြစ် မည်သို့ဆောင်ရွက်နိုင်သည်ကို ပြသသည်။
Aedes ခြင်များကြောင့်ဖြစ်ပွားသော ဗက်တာပိုးများကြောင့်ကူးစက်သောရောဂါများသည် ကမ္ဘာလုံးဆိုင်ရာပြည်သူ့ကျန်းမာရေးပြဿနာကြီးတစ်ခုအဖြစ်ရှိနေဆဲဖြစ်သည်။ ခြင်မှတစ်ဆင့်ကူးစက်သောရောဂါများဖြစ်ပွားမှုသည် ပထဝီဝင်အနေအထားအရ1,2,3 ပျံ့နှံ့ပြီး ပြန်လည်ပေါ်ပေါက်လာကာ ပြင်းထန်သောရောဂါများဖြစ်ပွားမှုကိုဖြစ်ပေါ်စေသည်4,5,6,7။ လူသားများနှင့် တိရစ္ဆာန်များ (ဥပမာ chikungunya၊ သွေးလွန်တုပ်ကွေး၊ Rift Valley အဖျား၊ အဝါရောင်အဖျားနှင့် Zika ဗိုင်းရပ်စ်) တို့တွင် ရောဂါများပျံ့နှံ့မှုသည် မကြုံစဖူးဖြစ်သည်။ သွေးလွန်တုပ်ကွေးတစ်ခုတည်းကြောင့် အပူပိုင်းဒေသတွင် လူပေါင်း ၃.၆ ဘီလီယံခန့်သည် ရောဂါကူးစက်ခံရနိုင်ခြေရှိပြီး နှစ်စဉ်ရောဂါကူးစက်မှု ၃၉၀ သန်းခန့်ဖြစ်ပွားကာ တစ်နှစ်လျှင် သေဆုံးသူ ၆,၁၀၀ မှ ၂၄,၃၀၀ အထိရှိခဲ့သည်။ တောင်အမေရိကတွင် Zika ဗိုင်းရပ်စ်ပြန်လည်ပေါ်ပေါက်လာခြင်းနှင့် ဖြစ်ပွားခြင်းသည် ရောဂါကူးစက်ခံရသူအမျိုးသမီးများမှမွေးဖွားလာသောကလေးများတွင် ဦးနှောက်ပျက်စီးမှုကြောင့် ကမ္ဘာတစ်ဝှမ်း၏အာရုံစိုက်မှုကို ရရှိခဲ့သည်။ Kremer နှင့်အဖွဲ့သည် Aedes ခြင်များ၏ ပထဝီဝင်အနေအထားသည် ဆက်လက်တိုးချဲ့နေမည်ဖြစ်ပြီး ၂၀၅၀ ခုနှစ်တွင် ကမ္ဘာ့လူဦးရေ၏ထက်ဝက်သည် ခြင်မှတစ်ဆင့်ကူးစက်သော arbovirus များကြောင့်ကူးစက်နိုင်ခြေရှိလိမ့်မည်ဟု ခန့်မှန်းထားသည်။
မကြာသေးမီက တီထွင်ထုတ်လုပ်ထားသော သွေးလွန်တုပ်ကွေးနှင့် အဝါရောင်အဖျားရောဂါကာကွယ်ဆေးများမှလွဲ၍ ခြင်မှတစ်ဆင့်ကူးစက်သောရောဂါအများစုအတွက် ကာကွယ်ဆေးများကို မထုတ်လုပ်နိုင်သေးပါ9,10,11။ ကာကွယ်ဆေးများကို အရေအတွက်အကန့်အသတ်ဖြင့် ရရှိနိုင်ပြီး လက်တွေ့စမ်းသပ်မှုများတွင်သာ အသုံးပြုကြသည်။ ဓာတုပိုးသတ်ဆေးများကို အသုံးပြု၍ ခြင်သယ်ဆောင်သည့်ပိုးမွှားများကို ထိန်းချုပ်ခြင်းသည် ခြင်မှတစ်ဆင့်ကူးစက်သောရောဂါများပျံ့နှံ့မှုကို ထိန်းချုပ်ရန် အဓိကဗျူဟာတစ်ခုဖြစ်သည်12,13။ ဓာတုပိုးသတ်ဆေးများသည် ခြင်များကိုသတ်ရာတွင် ထိရောက်မှုရှိသော်လည်း ဓာတုပိုးသတ်ဆေးများကို ဆက်လက်အသုံးပြုခြင်းသည် ပစ်မှတ်မဟုတ်သောသက်ရှိများကို ဆိုးကျိုးသက်ရောက်စေပြီး ပတ်ဝန်းကျင်ကိုညစ်ညမ်းစေသည်14,15,16။ ပို၍စိုးရိမ်စရာကောင်းသည်မှာ ဓာတုပိုးသတ်ဆေးများကို ခြင်များခံနိုင်ရည်ရှိလာခြင်း၏ လမ်းကြောင်းဖြစ်သည်17,18,19။ ပိုးသတ်ဆေးများနှင့် ဆက်စပ်နေသော ဤပြဿနာများသည် ရောဂါသယ်ဆောင်သည့်ပိုးမွှားများကို ထိန်းချုပ်ရန် ထိရောက်ပြီး ပတ်ဝန်းကျင်နှင့် သဟဇာတဖြစ်သော အခြားရွေးချယ်စရာများကို ရှာဖွေမှုကို အရှိန်မြှင့်ပေးခဲ့သည်။
ပိုးမွှားထိန်းချုပ်ရေးအတွက် အပင်အမျိုးမျိုးကို phytopesticides များ၏ရင်းမြစ်များအဖြစ် တီထွင်ခဲ့ကြသည်20,21။ အပင်ပစ္စည်းများသည် ဇီဝပျက်စီးနိုင်ပြီး နို့တိုက်သတ္တဝါများ၊ ငါးများနှင့် ကုန်းနေရေနေသတ္တဝါများကဲ့သို့သော ပစ်မှတ်မဟုတ်သော သက်ရှိများအတွက် အဆိပ်အတောက်ဖြစ်စေမှုနည်းပါးခြင်း သို့မဟုတ် မပြောပလောက်သော အဆိပ်အတောက်ဖြစ်စေမှု 20,22 ရှိသောကြောင့် ယေဘုယျအားဖြင့် ပတ်ဝန်းကျင်နှင့် သဟဇာတဖြစ်သည်။ ဆေးဖက်ဝင်အပင်ပြင်ဆင်မှုများသည် ခြင်များ၏ ဘဝအဆင့်အမျိုးမျိုးကို ထိရောက်စွာထိန်းချုပ်ရန် လုပ်ဆောင်ချက်ယန္တရားအမျိုးမျိုးဖြင့် ဇီဝတက်ကြွဒြပ်ပေါင်းအမျိုးမျိုးကို ထုတ်လုပ်ကြောင်း လူသိများသည်23,24,25,26။ အဆီအနှစ်များနှင့် အခြားတက်ကြွသော အပင်ပါဝင်ပစ္စည်းများကဲ့သို့သော အပင်မှရရှိသောဒြပ်ပေါင်းများသည် အာရုံစိုက်မှုကို ရရှိခဲ့ပြီး ခြင်များကို ထိန်းချုပ်ရန် ဆန်းသစ်သောကိရိယာများအတွက် လမ်းခင်းပေးခဲ့သည်။ အဆီအနှစ်များ၊ monoterpenes နှင့် sesquiterpenes များသည် တွန်းလှန်ဆေး၊ အစာစားခြင်းကို တားဆီးပေးသည့်ဆေးနှင့် ovicides များအဖြစ် လုပ်ဆောင်သည်27,28,29,30,31,32,33။ ဟင်းသီးဟင်းရွက်ဆီများစွာသည် ခြင်လောင်းများ၊ ပိုးလောင်းများနှင့် အရွယ်ရောက်ပြီးသော ခြင်များကို သေဆုံးစေသည်34,35,36၊ အင်းဆက်များ၏ အာရုံကြော၊ အသက်ရှူလမ်းကြောင်းဆိုင်ရာ၊ endocrine နှင့် အခြားအရေးကြီးသောစနစ်များကို ထိခိုက်စေသည်37။
မကြာသေးမီက လေ့လာမှုများအရ မုန်ညင်းပင်များနှင့် ၎င်းတို့၏ မျိုးစေ့များကို ဇီဝတက်ကြွဒြပ်ပေါင်းများ၏ အရင်းအမြစ်အဖြစ် အသုံးပြုနိုင်ခြေကို ထိုးထွင်းသိမြင်စေခဲ့သည်။ မုန်ညင်းစေ့မှုန့်ကို ဇီဝအဆိပ်သင့်စေသောပစ္စည်းအဖြစ် စမ်းသပ်ခဲ့ပြီး ပေါင်းပင်နှိမ်နင်းရေးအတွက် မြေဆီလွှာပြုပြင်မှုအဖြစ် အသုံးပြုခဲ့ပြီး မြေဆီလွှာတွင် ကျရောက်သော အပင်ရောဂါပိုးများကို ထိန်းချုပ်ရန်အတွက် အသုံးပြုခဲ့သည်။ နီမတုတ် ၄၁၊ ၅၁၊ ၅၂၊ ၅၃၊ ၅၄ နှင့် ပိုးမွှားများ ၅၅၊ ၅၆၊ ၅၇၊ ၅၈၊ ၅၉၊ ၆၀။ ဤမျိုးစေ့မှုန့်များ၏ မှိုသတ်ဆေးအာနိသင်ကို isothiocyanates ဟုခေါ်သော အပင်ကာကွယ်ပေးသည့် ဒြပ်ပေါင်းများကြောင့်ဟု ယူဆရသည်။ အပင်များတွင် ဤကာကွယ်ပေးသည့် ဒြပ်ပေါင်းများကို အပင်ဆဲလ်များတွင် ဇီဝတက်ကြွမဟုတ်သော glucosinolates ပုံစံဖြင့် သိမ်းဆည်းထားသည်။ သို့သော် အပင်များသည် အင်းဆက်ပိုးမွှားများ စားသုံးခြင်း သို့မဟုတ် ရောဂါပိုးကူးစက်မှုကြောင့် ပျက်စီးသွားသောအခါ glucosinolates များကို myrosinase မှ ဇီဝတက်ကြွ isothiocyanates ၅၅၊ ၆၁ အဖြစ် ရေဓာတ်ပြိုကွဲစေသည်။ Isothiocyanates များသည် ကျယ်ပြန့်သော ရောဂါပိုးမွှားတိုက်ဖျက်နိုင်စွမ်းနှင့် ပိုးသတ်နိုင်စွမ်းရှိသည်ဟု လူသိများသော ပျံ့လွင့်လွယ်သော ဒြပ်ပေါင်းများဖြစ်ပြီး ၎င်းတို့၏ဖွဲ့စည်းပုံ၊ ဇီဝဗေဒဆိုင်ရာ လုပ်ဆောင်ချက်နှင့် ပါဝင်မှုမှာ Brassicaceae မျိုးစိတ်များ42,59,62,63 အလိုက် ကွဲပြားပါသည်။
မုန်ညင်းစေ့မှုန့်မှရရှိသော isothiocyanates သည် ပိုးသတ်နိုင်သည့်အာနိသင်ရှိသည်ဟု သိရှိကြသော်လည်း ဆေးပညာအရ အရေးကြီးသော arthropod vector များကို ဆန့်ကျင်သည့် ဇီဝဗေဒဆိုင်ရာ လုပ်ဆောင်ချက်ဆိုင်ရာ အချက်အလက်များ ချို့တဲ့နေပါသည်။ ကျွန်ုပ်တို့၏ လေ့လာမှုတွင် အဆီထုတ်ထားသော မျိုးစေ့မှုန့်လေးမျိုး၏ ပိုးလောင်းများကို Aedes ခြင်များအပေါ် ပိုးလောင်းများကို တိုက်ခိုက်သည့် အာနိသင်ကို စစ်ဆေးခဲ့သည်။ Aedes aegypti ၏ ပိုးလောင်းများ။ လေ့လာမှု၏ ရည်ရွယ်ချက်မှာ ခြင်ထိန်းချုပ်ရေးအတွက် ပတ်ဝန်းကျင်နှင့် သဟဇာတဖြစ်သော ဇီဝပိုးသတ်ဆေးအဖြစ် ၎င်းတို့၏ အလားအလာကို အကဲဖြတ်ရန်ဖြစ်သည်။ မျိုးစေ့မှုန့်၏ အဓိက ဓာတုဒြပ်ပေါင်းသုံးမျိုးဖြစ်သည့် allyl isothiocyanate (AITC)၊ benzyl isothiocyanate (BITC) နှင့် 4-hydroxybenzylisothiocyanate (4-HBITC) တို့ကိုလည်း ခြင်လောင်းများအပေါ် ဤဓာတုဒြပ်ပေါင်းများ၏ ဇီဝဗေဒဆိုင်ရာ လုပ်ဆောင်ချက်ကို စမ်းသပ်ရန် စမ်းသပ်ခဲ့သည်။ ဤသည်မှာ ဂေါ်ဖီထုပ်မျိုးစေ့မှုန့်လေးမျိုးနှင့် ၎င်းတို့၏ အဓိက ဓာတုဒြပ်ပေါင်းများ၏ ခြင်လောင်းများကို တိုက်ခိုက်သည့် အာနိသင်ကို အကဲဖြတ်သည့် ပထမဆုံး အစီရင်ခံစာဖြစ်သည်။
Aedes aegypti (Rockefeller မျိုးကွဲ) ဓာတ်ခွဲခန်းကိုလိုနီများကို ၂၆°C၊ ဆွေမျိုးစိုထိုင်းဆ ၇၀% (RH) နှင့် ၁၀:၁၄ နာရီ (L:D အလင်းရောင်ကာလ) တွင် ထိန်းသိမ်းထားသည်။ မိတ်လိုက်သောအမများကို ပလတ်စတစ်လှောင်အိမ်များ (အမြင့် ၁၁ စင်တီမီတာနှင့် အချင်း ၉.၅ စင်တီမီတာ) တွင်ထားပြီး citrated bovine သွေး (HemoStat Laboratories Inc., Dixon, CA, USA) ကိုအသုံးပြု၍ ပုလင်းကျွေးစနစ်ဖြင့် ကျွေးသည်။ အပူချိန်ထိန်းချုပ်မှု ၃၇°C ရှိသော circulating water bath tube (HAAKE S7, Thermo-Scientific, Waltham, MA, USA) နှင့်ချိတ်ဆက်ထားသော membrane multi-glass feeder (Chemglass, Life Sciences LLC, Vineland, NJ, USA) ကို အသုံးပြု၍ ပုံမှန်အတိုင်း သွေးကျွေးခဲ့သည်။ ဖန်အစာကျွေးခန်းတစ်ခုစီ၏အောက်ခြေ (ဧရိယာ ၁၅၄ mm2) တွင် Parafilm M အလွှာကို ဆန့်ထုတ်ပါ။ ထို့နောက် မိတ်လိုက်သောအမပါဝင်သော လှောင်အိမ်အား ဖုံးအုပ်ထားသော အပေါ်ဆုံးဇယားကွက်ပေါ်တွင် ထားရှိသည်။ Pasteur pipette (Fisherbrand, Fisher Scientific, Waltham, MA, USA) ကို အသုံးပြု၍ နွားသွေး ၃၅၀-၄၀၀ μl ခန့်ကို ဖန်ခွက်အစာကျွေးသည့် funnel ထဲသို့ထည့်ပြီး အရွယ်ရောက်ပြီးသော တီကောင်များကို အနည်းဆုံး တစ်နာရီခန့် စစ်ထုတ်ထားခဲ့သည်။ ထို့နောက် ကိုယ်ဝန်ဆောင်အမများကို ၁၀% sucrose solution ပေးပြီး သီးခြား ultra-clear soufflé ခွက်များ (1.25 fl oz size, Dart Container Corp., Mason, MI, USA) ဖြင့် စီထားသော စိုစွတ်သော filter paper ပေါ်တွင် ဥများဥစေသည်။ ဥများပါသော filter paper ကို လေလုံသောအိတ် (SC Johnsons, Racine, WI) ထဲတွင်ထည့်ပြီး ၂၆°C တွင် သိမ်းဆည်းပါ။ ဥများကို ပေါက်ဖွားစေပြီး လောင်းကောင် ၂၀၀-၂၅၀ ခန့်ကို ယုန် chow (ZuPreem, Premium Natural Products, Inc., Mission, KS, USA)၊ အသည်းမှုန့် (MP Biomedicals, LLC, Solon, OH, USA) နှင့် ငါးအသားလွှာ (TetraMin, Tetra GMPH, Meer, Germany) တို့ကို ၂:၁:၁ အချိုးဖြင့် မွေးမြူခဲ့သည်။ ကျွန်ုပ်တို့၏ ဇီဝစမ်းသပ်မှုများတွင် တတိယအဆင့်နှောင်းပိုင်း လောင်းများကို အသုံးပြုခဲ့သည်။
ဤလေ့လာမှုတွင် အသုံးပြုသော အပင်မျိုးစေ့များကို အောက်ပါစီးပွားဖြစ်နှင့် အစိုးရရင်းမြစ်များမှ ရရှိခဲ့သည်- အမေရိကန်ပြည်ထောင်စု၊ ဝါရှင်တန်ပြည်နယ်၊ Pacific Northwest Farmers' Cooperative မှ Brassica juncea (အညိုရောင်မုန်ညင်း-Pacific Gold) နှင့် Brassica juncea (အဖြူရောင်မုန်ညင်း-Ida Gold)၊ အမေရိကန်ပြည်ထောင်စု၊ Peoria၊ IL၊ Kelly Seed and Hardware Co. မှ (Garden Cress) နှင့် အမေရိကန်ပြည်ထောင်စု၊ Peoria၊ IL၊ USDA-ARS မှ Thlaspi arvense (Field Pennycress-Elisabeth)။ လေ့လာမှုတွင် အသုံးပြုသော မျိုးစေ့များကို ပိုးသတ်ဆေးများဖြင့် ကုသထားခြင်း မရှိပါ။ မျိုးစေ့ပစ္စည်းအားလုံးကို ဒေသန္တရနှင့် အမျိုးသားစည်းမျဉ်းများနှင့် သက်ဆိုင်ရာ ဒေသန္တရပြည်နယ်နှင့် အမျိုးသားစည်းမျဉ်းများအားလုံးနှင့်အညီ ပြုပြင်ပြီး ဤလေ့လာမှုတွင် အသုံးပြုခဲ့သည်။ ဤလေ့လာမှုသည် မျိုးဗီဇပြောင်းလဲထားသော အပင်မျိုးကွဲများကို မစစ်ဆေးခဲ့ပါ။
Brassica juncea (PG), Alfalfa (Ls), White mustard (IG), Thlaspi arvense (DFP) မျိုးစေ့များကို 0.75 mm mesh နှင့် Stainless steel rotor, 12 teeth, 10,000 rpm တပ်ဆင်ထားသော Retsch ZM200 ultracentrifugal mill (Retsch, Haan, Germany) ကို အသုံးပြု၍ အမှုန့်ကြိတ်ခဲ့သည် (ဇယား ၁)။ အမှုန့်ကြိတ်ထားသော မျိုးစေ့မှုန့်ကို စက္ကူချုပ်စက်ထဲသို့ လွှဲပြောင်းပြီး Soxhlet ကိရိယာတွင် hexane ဖြင့် အဆီထုတ်ပြီး ၂၄ နာရီကြာ ကြိတ်ခဲ့သည်။ အဆီထုတ်ထားသော လယ်ကွင်းမုန်ညင်းနမူနာတစ်ခုကို myrosinase ကို ပျက်စီးစေပြီး glucosinolates ၏ hydrolysis ကို ကာကွယ်ပြီး ဇီဝဗေဒအရ တက်ကြွသော isothiocyanates ဖွဲ့စည်းရန် 100 °C တွင် 1 နာရီကြာ အပူပေးခဲ့သည်။ အပူပေးထားသော မြင်းမြီးမျိုးစေ့မှုန့် (DFP-HT) ကို myrosinase ကို ပျက်စီးစေခြင်းဖြင့် negative control အဖြစ် အသုံးပြုခဲ့သည်။
အဆီထုတ်ထားသော မျိုးစေ့မှုန့်တွင် ဂလူးကိုစီနိုလိတ်ပါဝင်မှုကို ယခင်ကထုတ်ဝေခဲ့သော ပရိုတိုကော ၆၄ အရ မြင့်မားသောစွမ်းဆောင်ရည်ရှိသော အရည်ခရိုမာတိုဂရပ်ဖီ (HPLC) ကို အသုံးပြု၍ သုံးထပ်ခွဲ ဆုံးဖြတ်ခဲ့သည်။ အကျဉ်းချုပ်ပြောရလျှင် အဆီထုတ်ထားသော မျိုးစေ့မှုန့် ၂၅၀ မီလီဂရမ်နမူနာထဲသို့ မီသနော ၃ မီလီလီတာကို ထည့်ခဲ့သည်။ နမူနာတစ်ခုစီကို ရေကန်ထဲတွင် မိနစ် ၃၀ ကြာ sonicated လုပ်ကာ ၂၃°C တွင် မှောင်မိုက်သောနေရာတွင် ၁၆ နာရီကြာထားခဲ့သည်။ ထို့နောက် အော်ဂဲနစ်အလွှာ၏ ၁ မီလီလီတာကို 0.45 μm filter မှတစ်ဆင့် autosampler ထဲသို့ စစ်ထုတ်ခဲ့သည်။ Shimadzu HPLC စနစ် (LC 20AD ပန့်နှစ်ခု၊ SIL 20A autosampler၊ DGU 20As degasser၊ 237 nm တွင် စောင့်ကြည့်ရန်အတွက် SPD-20A UV-VIS detector နှင့် CBM-20A ဆက်သွယ်ရေးဘတ်စ်ကားမော်ဂျူး) ပေါ်တွင် လုပ်ဆောင်ပြီး မျိုးစေ့မှုန့်တွင် ဂလူးကိုစီနိုလိတ်ပါဝင်မှုကို Shimadzu LC Solution software version 1.25 (Shimadzu Corporation, Columbia, MD, USA) ကို အသုံးပြု၍ သုံးထပ်ခွဲ ဆုံးဖြတ်ခဲ့သည်။ ကော်လံသည် C18 Inertsil reverse phase column (250 mm × 4.6 mm; RP C-18, ODS-3, 5u; GL Sciences, Torrance, CA, USA) ဖြစ်သည်။ ကနဦး မိုဘိုင်းအဆင့် အခြေအနေများကို ရေတွင် 12% methanol/88% 0.01 M tetrabutylammonium hydroxide (TBAH; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) တွင် 1 mL/min စီးဆင်းမှုနှုန်းဖြင့် သတ်မှတ်ထားသည်။ နမူနာ 15 μl ထိုးသွင်းပြီးနောက်၊ ကနဦးအခြေအနေများကို မိနစ် 20 ကြာ ထိန်းသိမ်းထားပြီးနောက် ပျော်ရည်အချိုးကို 100% methanol သို့ ချိန်ညှိခဲ့ပြီး စုစုပေါင်းနမူနာ ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာချိန် မိနစ် 65 ရှိသည်။ အသစ်ပြင်ဆင်ထားသော sinapine၊ glucosinolate နှင့် myrosin စံနှုန်းများ (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) ကို အဆက်မပြတ် ပျော်ရည်လုပ်ခြင်းဖြင့် စံညွှန်းမျဉ်းကွေး (nM/mAb အခြေခံ) ကို ထုတ်ပေးပြီး အဆီထုတ်ထားသော မျိုးစေ့မှုန့် glucosinolates ၏ ဆာလ်ဖာပါဝင်မှုကို ခန့်မှန်းသည်။ နမူနာများရှိ ဂလူးကိုစီနိုလိတ် ပါဝင်မှုများကို တူညီသောကော်လံတပ်ဆင်ထားပြီး ယခင်ကဖော်ပြခဲ့သည့်နည်းလမ်းကို အသုံးပြု၍ Agilent 1100 HPLC (Agilent, Santa Clara, CA, USA) တွင် စမ်းသပ်ခဲ့သည်။ ဂလူးကိုစီနိုလိတ် ပါဝင်မှုများကို ဆုံးဖြတ်ခဲ့သည်။ HPLC စနစ်များအကြား နှိုင်းယှဉ်နိုင်သည်။
Allyl isothiocyanate (၉၄%၊ တည်ငြိမ်သည်) နှင့် benzyl isothiocyanate (၉၈%) တို့ကို Fisher Scientific (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA) မှ ဝယ်ယူခဲ့သည်။ 4-Hydroxybenzylisothiocyanate ကို ChemCruz (Santa Cruz Biotechnology, CA, USA) မှ ဝယ်ယူခဲ့သည်။ myrosinase မှ အင်ဇိုင်းဖြင့် hydrolize လုပ်သောအခါ glucosinolates၊ glucosinolates နှင့် glucosinolates တို့သည် allyl isothiocyanate၊ benzyl isothiocyanate နှင့် 4-hydroxybenzylisothiocyanate တို့ကို အသီးသီး ဖွဲ့စည်းသည်။
Muturi et al. 32 ၏ နည်းလမ်းအတိုင်း ပြုပြင်မွမ်းမံမှုများဖြင့် ဓာတ်ခွဲခန်း ဇီဝစမ်းသပ်မှုများကို ပြုလုပ်ခဲ့သည်။ လေ့လာမှုတွင် အဆီနည်း မျိုးစေ့အစာ ငါးမျိုးကို အသုံးပြုခဲ့သည်- DFP၊ DFP-HT၊ IG၊ PG နှင့် Ls။ ပိုးလောင်း အယောက် ၂၀ ကို တစ်ခါသုံး သုံးလမ်းသွား ဘီကာ (VWR International, LLC, Radnor, PA, USA) 120 mL အိုင်းယွန်းကင်းစင်သောရေ (dH2O) ပါ၀င်သည့် 400 mL ထဲတွင် ထည့်ခဲ့သည်။ ခြင်လောင်း အဆိပ်သင့်မှုအတွက် မျိုးစေ့မှုန့် ပါဝင်မှု ခုနစ်မျိုးကို စမ်းသပ်ခဲ့သည်- DFP မျိုးစေ့မှုန့်၊ DFP-HT၊ IG နှင့် PG အတွက် 0.01၊ 0.02၊ 0.04၊ 0.06၊ 0.08၊ 0.1 နှင့် 0.12 g မျိုးစေ့မှုန့်/120 ml dH2O။ ကနဦး ဇီဝစမ်းသပ်မှုများက အဆီထုတ်ထားသော Ls မျိုးစေ့မှုန့်သည် စမ်းသပ်ထားသော အခြားမျိုးစေ့မှုန့်လေးမျိုးထက် ပိုမိုအဆိပ်သင့်ကြောင်း ညွှန်ပြသည်။ ထို့ကြောင့်၊ ကျွန်ုပ်တို့သည် Ls မျိုးစေ့မှုန့်၏ ကုသမှုပါဝင်မှု ခုနစ်မျိုးကို အောက်ပါပါဝင်မှုများသို့ ချိန်ညှိခဲ့သည်- 0.015၊ 0.025၊ 0.035၊ 0.045၊ 0.055၊ 0.065 နှင့် 0.075 g/120 mL dH2O။
စမ်းသပ်စစ်ဆေးသည့်အခြေအနေများအောက်တွင် ပုံမှန်အင်းဆက်သေဆုံးမှုကို အကဲဖြတ်ရန်အတွက် ကုသမှုမခံယူရသေးသော ထိန်းချုပ်အဖွဲ့ (dH20၊ မျိုးစေ့မှုန့်ဖြည့်စွက်စာမပါ) ကို ထည့်သွင်းထားသည်။ မျိုးစေ့မှုန့်တစ်ခုစီအတွက် အဆိပ်ဗေဒဆိုင်ရာ ဇီဝစမ်းသပ်မှုများတွင် ပုံတူသုံးထပ် beaker သုံးခု (beaker တစ်ခုလျှင် တတိယနှောင်းပိုင်းအဆင့် လောင်း ၂၀) ပါဝင်ပြီး စုစုပေါင်းပုလင်း ၁၀၈ လုံးပါဝင်သည်။ ကုသထားသော ဘူးများကို အခန်းအပူချိန် (၂၀-၂၁°C) တွင် သိမ်းဆည်းထားပြီး ကုသမှုပြင်းအားများကို ၂၄ နာရီနှင့် ၇၂ နာရီအတွင်း ဆက်တိုက်ထိတွေ့မှုအတွင်း လောင်းသေဆုံးမှုကို မှတ်တမ်းတင်ခဲ့သည်။ ခြင်၏ခန္ဓာကိုယ်နှင့် ခြေလက်အင်္ဂါများသည် ပါးလွှာသော stainless steel spatula ဖြင့် ထိုးဖောက်ခြင်း သို့မဟုတ် ထိကိုင်ခြင်းပြုလုပ်သည့်အခါ မလှုပ်ရှားပါက ခြင်လောင်းများကို သေဆုံးသည်ဟု ယူဆသည်။ သေဆုံးသွားသော လောင်းများသည် ဘူး၏အောက်ခြေ သို့မဟုတ် ရေမျက်နှာပြင်ပေါ်တွင် ကျောဘက် သို့မဟုတ် ဝမ်းဗိုက်အနေအထားတွင် မလှုပ်မယှက်ရှိနေလေ့ရှိသည်။ ကုသမှုပြင်းအားတစ်ခုစီကို ထိတွေ့မှုပြုလုပ်ခဲ့သော လောင်း ၁၈၀ အတွက် ကွဲပြားသော လောင်းအုပ်စုများကို အသုံးပြု၍ စမ်းသပ်မှုကို မတူညီသောရက်များတွင် သုံးကြိမ်ထပ်ခါတလဲလဲပြုလုပ်ခဲ့ပြီး စုစုပေါင်း လောင်း ၁၈၀ ကောင် ကုသမှုပြင်းအားတစ်ခုစီကို ထိတွေ့ခဲ့သည်။
AITC၊ BITC နှင့် 4-HBITC တို့၏ ခြင်လောင်းများအပေါ် အဆိပ်သင့်မှုကို တူညီသော ဇီဝစမ်းသပ်မှု လုပ်ထုံးလုပ်နည်းကို အသုံးပြု၍ အကဲဖြတ်ခဲ့သော်လည်း ကုသမှုများ မတူညီပါ။ ဓာတုပစ္စည်း ၁၀၀ µL ကို ၂-mL centrifuge ပြွန်တစ်ခုတွင် absolute ethanol ၉၀၀ µL ထဲသို့ထည့်ပြီး သေချာရောနှောရန် စက္ကန့် ၃၀ လှုပ်ခါခြင်းဖြင့် ဓာတုပစ္စည်းတစ်ခုစီအတွက် ppm စတော့အရည် ၁၀၀,၀၀၀ ပြင်ဆင်ပါ။ BITC သည် AITC နှင့် 4-HBITC ထက် အဆိပ်အတောက်များစွာ ပိုမိုများပြားကြောင်း တွေ့ရှိခဲ့သည့် ကျွန်ုပ်တို့၏ ကနဦး ဇီဝစမ်းသပ်မှုများအပေါ် အခြေခံ၍ ကုသမှုပြင်းအားများကို ဆုံးဖြတ်ခဲ့သည်။ အဆိပ်သင့်မှုကို ဆုံးဖြတ်ရန်အတွက် BITC ပါဝင်မှု ၅ ခု (၁၊ ၃၊ ၆၊ ၉ နှင့် ၁၂ ppm)၊ AITC ပါဝင်မှု ၇ ခု (၅၊ ၁၀၊ ၁၅၊ ၂၀၊ ၂၅၊ ၃၀ နှင့် ၃၅ ppm) နှင့် 4-HBITC ပါဝင်မှု ၆ ခု (၁၅၊ ၁၅၊ ၂၀၊ ၂၅၊ ၃၀ နှင့် ၃၅ ppm) တို့ကို အသုံးပြုခဲ့သည်။ ၃၀၊ ၄၅၊ ၆၀၊ ၇၅ နှင့် ၉၀ ppm)။ ထိန်းချုပ်ကုသမှုကို ဓာတုကုသမှု၏ အများဆုံးပမာဏနှင့် ညီမျှသော ပကတိအီသနော ၁၀၈ μL ဖြင့် ထိုးသွင်းခဲ့သည်။ ဇီဝစမ်းသပ်မှုများကို အထက်ဖော်ပြပါအတိုင်း ထပ်မံပြုလုပ်ခဲ့ပြီး ကုသမှုပြင်းအားတစ်ခုလျှင် ပိုးလောင်း ၁၈၀ ကောင်ကို ဖော်ထုတ်ခဲ့သည်။ ၂၄ နာရီဆက်တိုက် ထိတွေ့ပြီးနောက် AITC၊ BITC နှင့် 4-HBITC ပြင်းအားတစ်ခုစီအတွက် ပိုးလောင်းသေဆုံးမှုကို မှတ်တမ်းတင်ခဲ့သည်။
Polo ဆော့ဖ်ဝဲ (Polo Plus၊ LeOra ဆော့ဖ်ဝဲ၊ ဗားရှင်း 1.0) ကို အသုံးပြု၍ အသက်ဆုံးရှုံးနိုင်ခြေ ၅၀% (LC50)၊ ၉၀% အသက်ဆုံးရှုံးနိုင်ခြေ (LC90)၊ စောင်း၊ အသက်ဆုံးရှုံးနိုင်ခြေ ပမာဏကိန်းဂဏန်းနှင့် ၉၅% အသက်ဆုံးရှုံးနိုင်ခြေ ပမာဏတို့ကို တွက်ချက်ရန် Probit ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုကို ပြုလုပ်ခဲ့သည်။ log-transformed ပမာဏနှင့် dose-mortality curves များအတွက် အသက်ဆုံးရှုံးနိုင်ခြေ ပမာဏအချိုးများအတွက် ယုံကြည်မှုအပိုင်းအခြားများအပေါ် အခြေခံသည်။ သေဆုံးနိုင်ခြေ အချက်အလက်များသည် ကုသမှုပါဝင်မှုတစ်ခုစီနှင့် ထိတွေ့ထားသော ပိုးလောင်း ၁၈၀ ၏ ပေါင်းစပ်ပုံတူဒေတာများအပေါ် အခြေခံသည်။ မျိုးစေ့မှုန့်တစ်ခုစီနှင့် ဓာတုအစိတ်အပိုင်းတစ်ခုစီအတွက် ဖြစ်နိုင်ခြေ ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုများကို သီးခြားစီ ပြုလုပ်ခဲ့သည်။ သေစေနိုင်သော ပမာဏအချိုး၏ ၉၅% ယုံကြည်မှုအပိုင်းအခြားအပေါ် အခြေခံ၍ မျိုးစေ့မှုန့်နှင့် ဓာတုပါဝင်ပစ္စည်းများ၏ ခြင်ပိုးလောင်းများအပေါ် အဆိပ်သင့်မှုကို သိသိသာသာ ကွဲပြားသည်ဟု ယူဆသောကြောင့် ၁ တန်ဖိုးပါဝင်သော ယုံကြည်မှုအပိုင်းအခြားသည် သိသိသာသာ ကွဲပြားခြင်းမရှိပါ၊ P = 0.0566။
အဆီထုတ်ထားသော မျိုးစေ့မှုန့် DFP၊ IG၊ PG နှင့် Ls တို့တွင် အဓိက glucosinolates များကို ဆုံးဖြတ်ရန်အတွက် HPLC ရလဒ်များကို ဇယား ၁ တွင် ဖော်ပြထားသည်။ စမ်းသပ်ထားသော မျိုးစေ့မှုန့်များတွင် အဓိက glucosinolates များသည် myrosinase glucosinolates ပါဝင်သော DFP နှင့် PG မှလွဲ၍ ကွဲပြားသည်။ PG တွင် myrosinin ပါဝင်မှုသည် DFP ထက် ပိုမိုမြင့်မားပြီး ၃၃.၃ ± ၁.၅ နှင့် ၂၆.၅ ± ၀.၉ mg/g အသီးသီးရှိသည်။ Ls မျိုးစေ့မှုန့်တွင် glucoglycone ၃၆.၆ ± ၁.၂ mg/g ပါဝင်ပြီး IG မျိုးစေ့မှုန့်တွင် sinapine ၃၈.၀ ± ၀.၅ mg/g ပါဝင်သည်။
Ae. Aedes aegypti ခြင်များ၏ ပိုးလောင်းများကို အဆီထုတ်ထားသော မျိုးစေ့မှုန့်ဖြင့် ကုသသောအခါတွင် သေဆုံးစေခဲ့သော်လည်း ကုသမှု၏ ထိရောက်မှုသည် အပင်မျိုးစိတ်ပေါ် မူတည်၍ ကွဲပြားပါသည်။ DFP-NT တစ်ခုတည်းသာ ၂၄ နာရီနှင့် ၇၂ နာရီ ထိတွေ့ပြီးနောက် ခြင်လောင်းများအတွက် အဆိပ်မဖြစ်စေပါ (ဇယား ၂)။ တက်ကြွသော မျိုးစေ့မှုန့်၏ အဆိပ်သင့်မှုသည် ပြင်းအားတိုးလာသည်နှင့်အမျှ တိုးလာသည် (ပုံ ၁က၊ ခ)။ မျိုးစေ့မှုန့်၏ ခြင်လောင်းများအတွက် အဆိပ်သင့်မှုသည် ၂၄ နာရီနှင့် ၇၂ နာရီ အကဲဖြတ်မှုများတွင် LC50 တန်ဖိုးများ၏ သေစေနိုင်သောဆေးပမာဏအချိုး ၉၅% CI ပေါ်မူတည်၍ သိသိသာသာ ကွဲပြားသည် (ဇယား ၃)။ ၂၄ နာရီအကြာတွင် Ls မျိုးစေ့မှုန့်၏ အဆိပ်သင့်မှုအာနိသင်သည် အခြားမျိုးစေ့မှုန့်ကုသမှုများထက် ပိုမိုများပြားပြီး အမြင့်ဆုံးလုပ်ဆောင်မှုနှင့် ပိုးလောင်းများအတွက် အဆိပ်သင့်မှုအများဆုံးဖြစ်သည် (LC50 = 0.04 g/120 ml dH2O)။ IG၊ Ls နှင့် PG မျိုးစေ့မှုန့် ကုသမှုများနှင့် နှိုင်းယှဉ်ပါက ၂၄ နာရီအတွင်း ပိုးလောင်းများသည် DFP ကို အာရုံခံနိုင်စွမ်း နည်းပါးပြီး LC50 တန်ဖိုးများသည် 0.115၊ 0.04 နှင့် 0.08 g/120 ml dH2O အသီးသီးရှိပြီး LC50 တန်ဖိုးထက် စာရင်းအင်းအရ မြင့်မားပါသည်။ 0.211 g/120 ml dH2O (ဇယား ၃)။ DFP၊ IG၊ PG နှင့် Ls တို့၏ LC90 တန်ဖိုးများသည် 0.376၊ 0.275၊ 0.137 နှင့် 0.074 g/120 ml dH2O အသီးသီးဖြစ်သည် (ဇယား ၂)။ DPP ၏ အမြင့်ဆုံးပါဝင်မှုမှာ 0.12 g/120 ml dH2O ဖြစ်သည်။ ၂၄ နာရီ အကဲဖြတ်ပြီးနောက် ပျမ်းမျှပိုးလောင်းသေဆုံးမှုမှာ ၁၂% သာရှိပြီး IG နှင့် PG ပိုးလောင်းများ၏ ပျမ်းမျှသေဆုံးမှုမှာ အသီးသီး ၅၁% နှင့် ၈၂% သို့ ရောက်ရှိခဲ့သည်။ ၂၄ နာရီကြာ အကဲဖြတ်ပြီးနောက်၊ Ls မျိုးစေ့မှုန့် အမြင့်ဆုံးပါဝင်မှု (0.075 g/120 ml dH2O) အတွက် ပျမ်းမျှလောက်ကောင်သေဆုံးမှုမှာ 99% ရှိခဲ့သည် (ပုံ 1A)။
သေဆုံးမှုနှုန်းကို Ae အီဂျစ်လောင်း (တတိယအဆင့်လောင်း) ၏ ဆေးပမာဏတုံ့ပြန်မှု (Probit) မှ ကုသပြီး ၂၄ နာရီ (A) နှင့် ၇၂ နာရီ (B) အတွင်း မျိုးစေ့မှုန့်ပါဝင်မှုအပေါ် ခန့်မှန်းတွက်ချက်ခဲ့သည်။ အစက်ချမျဉ်းသည် မျိုးစေ့မှုန့်ကုသမှု၏ LC50 ကို ကိုယ်စားပြုသည်။ DFP Thlaspi arvense, DFP-HT အပူပေးပြီး အသက်မဲ့စေသော Thlaspi arvense, IG Sinapsis alba (Ida Gold), PG Brassica juncea (Pacific Gold), Ls Lepidium sativum။
၇၂ နာရီကြာ အကဲဖြတ်မှုတွင် DFP၊ IG နှင့် PG မျိုးစေ့မှုန့်များ၏ LC50 တန်ဖိုးများသည် အသီးသီး 0.111၊ 0.085 နှင့် 0.051 g/120 ml dH2O ရှိပါသည်။ Ls မျိုးစေ့မှုန့်ဖြင့် ထိတွေ့မိသော ပိုးလောင်းအားလုံးနီးပါးသည် ၇၂ နာရီကြာ ထိတွေ့ပြီးနောက် သေဆုံးသွားသောကြောင့် သေဆုံးမှုနှုန်းဒေတာသည် Probit ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုနှင့် ကိုက်ညီမှုမရှိပါ။ အခြားမျိုးစေ့မှုန့်များနှင့် နှိုင်းယှဉ်ပါက ပိုးလောင်းများသည် DFP မျိုးစေ့မှုန့်ကုသမှုကို အာရုံခံနိုင်စွမ်းနည်းပြီး စာရင်းအင်းအရ LC50 တန်ဖိုးများ မြင့်မားပါသည် (ဇယား ၂ နှင့် ၃)။ ၇၂ နာရီကြာပြီးနောက် DFP၊ IG နှင့် PG မျိုးစေ့မှုန့်ကုသမှုများအတွက် LC50 တန်ဖိုးများသည် အသီးသီး 0.111၊ 0.085 နှင့် 0.05 g/120 ml dH2O ဖြစ်သည်ဟု ခန့်မှန်းရပါသည်။ ၇၂ နာရီကြာ အကဲဖြတ်မှုအပြီးတွင် DFP၊ IG နှင့် PG မျိုးစေ့မှုန့်များ၏ LC90 တန်ဖိုးများသည် အသီးသီး 0.215၊ 0.254 နှင့် 0.138 g/120 ml dH2O ရှိပါသည်။ ၇၂ နာရီကြာ အကဲဖြတ်ပြီးနောက်၊ အများဆုံး 0.12 g/120 ml dH2O ပါဝင်မှုတွင် DFP၊ IG နှင့် PG မျိုးစေ့မှုန့် ကုသမှုများအတွက် ပျမ်းမျှလောက်ကောင်သေဆုံးမှုမှာ အသီးသီး 58%၊ 66% နှင့် 96% ရှိသည် (ပုံ 1B)။ ၇၂ နာရီကြာ အကဲဖြတ်ပြီးနောက်၊ PG မျိုးစေ့မှုန့်သည် IG နှင့် DFP မျိုးစေ့မှုန့်ထက် ပိုမိုအဆိပ်သင့်ကြောင်း တွေ့ရှိခဲ့သည်။
ဓာတုဗေဒနည်းဖြင့်ထုတ်လုပ်ထားသော အိုင်ဆိုသီယိုဆိုင်ယာနိတ်၊ အလိုင်းအိုင်ဆိုသီယိုဆိုင်ယာနိတ် (AITC)၊ ဘန်ဇိုင်းအိုင်ဆိုသီယိုဆိုင်ယာနိတ် (BITC) နှင့် 4-hydroxybenzylisothiocyanate (4-HBITC) တို့သည် ခြင်လောင်းများကို ထိရောက်စွာသတ်နိုင်သည်။ ကုသပြီး ၂၄ နာရီအကြာတွင် BITC သည် LC50 တန်ဖိုး 5.29 ppm ဖြင့် ခြင်လောင်းများအတွက် ပိုမိုအဆိပ်သင့်စေသည် (ဇယား ၄)။ AITC နှင့် BITC တို့နှင့် နှိုင်းယှဉ်ပါက 4-HBITC သည် အဆိပ်သင့်မှုနည်းပါးပြီး LC50 တန်ဖိုးမြင့်မားသည်။ အထိရောက်ဆုံးမျိုးစေ့မှုန့်တွင် ခြင်လောင်းအဆိပ်သင့်မှုတွင် အဓိက အိုင်ဆိုသီယိုဆိုင်ယာနိတ်နှစ်မျိုး (Ls နှင့် PG) ၏ ကွာခြားချက်များရှိသည်။ AITC၊ BITC နှင့် 4-HBITC အကြား LC50 တန်ဖိုးများ၏ သေစေနိုင်သောဆေးအချိုးအပေါ်အခြေခံသည့် အဆိပ်သင့်မှုသည် LC50 သေစေနိုင်သောဆေးအချိုး၏ 95% CI တွင် 1 တန်ဖိုးမပါဝင်ကြောင်း စာရင်းအင်းကွာခြားချက်ကိုပြသခဲ့သည် (P = 0.05၊ ဇယား 4)။ BITC နှင့် AITC နှစ်ခုလုံး၏ အမြင့်ဆုံးပါဝင်မှုများသည် စမ်းသပ်ထားသော ပိုးလောင်းများ၏ 100% ကို သတ်ပစ်ရန် ခန့်မှန်းထားသည် (ပုံ 2)။
Ae ၏ ဆေးပမာဏတုံ့ပြန်မှု (Probit) မှ သေဆုံးမှုနှုန်းကို ခန့်မှန်းခဲ့သည်။ ကုသမှုပြုလုပ်ပြီး ၂၄ နာရီအကြာတွင် အီဂျစ်ပိုးလောင်းများ (တတိယအဆင့်ပိုးလောင်း) သည် ဓာတုဗေဒနည်းဖြင့် ပေါင်းစပ်ထားသော isothiocyanate ပြင်းအားသို့ ရောက်ရှိခဲ့သည်။ အစက်ချမျဉ်းသည် isothiocyanate ကုသမှုအတွက် LC50 ကို ကိုယ်စားပြုသည်။ Benzyl isothiocyanate BITC၊ allyl isothiocyanate AITC နှင့် 4-HBITC။
ခြင်များကို သယ်ဆောင်သည့် ပိုးမွှားထိန်းချုပ်ရေးပစ္စည်းများအဖြစ် အပင်ဇီဝပိုးသတ်ဆေးများအသုံးပြုမှုကို ကြာမြင့်စွာကတည်းက လေ့လာခဲ့ကြသည်။ အပင်များစွာသည် ပိုးသတ်ဆေးအာနိသင်ရှိသော သဘာဝဓာတုပစ္စည်းများကို ထုတ်လုပ်ကြသည်။ ၎င်းတို့၏ ဇီဝတက်ကြွဒြပ်ပေါင်းများသည် ခြင်များအပါအဝင် ပိုးမွှားများကို ထိန်းချုပ်ရာတွင် အလားအလာကောင်းများရှိသည့် ဓာတုဗေဒနည်းဖြင့်ပြုလုပ်ထားသော ပိုးသတ်ဆေးများအတွက် ဆွဲဆောင်မှုရှိသော ရွေးချယ်မှုတစ်ခုကို ပေးစွမ်းသည်။
မုန်ညင်းပင်များကို ၎င်းတို့၏ မျိုးစေ့များအတွက် သီးနှံအဖြစ် စိုက်ပျိုးကြပြီး၊ ဟင်းခတ်အမွှေးအကြိုင်အဖြစ်နှင့် ဆီအရင်းအမြစ်အဖြစ် အသုံးပြုကြသည်။ မုန်ညင်းဆီကို မျိုးစေ့များမှ ထုတ်ယူသောအခါ သို့မဟုတ် ဇီဝလောင်စာအဖြစ် အသုံးပြုရန်အတွက် မုန်ညင်းကို ထုတ်ယူသောအခါ၊ ၆၉ ဘေးထွက်ပစ္စည်းမှာ အဆီထုတ်ထားသော မျိုးစေ့မှုန့်ဖြစ်သည်။ ဤမျိုးစေ့မှုန့်သည် ၎င်း၏ သဘာဝဇီဝဓာတုဗေဒ အစိတ်အပိုင်းများစွာနှင့် ရေဓာတ်ပြိုကွဲစေသော အင်ဇိုင်းများကို ထိန်းသိမ်းထားသည်။ ဤမျိုးစေ့မှုန့်၏ အဆိပ်သင့်မှုကို isothiocyanates55,60,61 ထုတ်လုပ်မှုကြောင့်ဟု ယူဆရသည်။ Isothiocyanates များကို မျိုးစေ့မှုန့်ကို ရေဓာတ်ဖြည့်တင်းစဉ် myrosinase အင်ဇိုင်းဖြင့် glucosinolates ၏ ရေဓာတ်ပြိုကွဲခြင်းဖြင့် ဖွဲ့စည်းထားပြီး မှိုသတ်ခြင်း၊ ဘက်တီးရီးယားသတ်ခြင်း၊ ပိုးသတ်ခြင်းနှင့် ပိုးသတ်ခြင်းဆိုင်ရာ အာနိသင်များအပြင် ဓာတုဗေဒဆိုင်ရာ အာနိသင်များနှင့် ဓာတုကုထုံးဆိုင်ရာ ဂုဏ်သတ္တိများအပါအဝင် အခြားဂုဏ်သတ္တိများရှိသည်ဟု လူသိများသည်61,62,70။ လေ့လာမှုများစွာအရ မုန်ညင်းပင်များနှင့် မျိုးစေ့မှုန့်သည် မြေဆီလွှာနှင့် သိုလှောင်ထားသော အစားအစာပိုးမွှားများကို နှိမ်နင်းရာတွင် fumigants အဖြစ် ထိရောက်စွာ လုပ်ဆောင်ကြောင်း ပြသထားသည်57,59,71,72။ ဤလေ့လာမှုတွင်၊ ကျွန်ုပ်တို့သည် မျိုးစေ့လေးမျိုးပါ မုန့်ညက်နှင့် ၎င်း၏ ဇီဝတက်ကြွထုတ်ကုန်သုံးမျိုးဖြစ်သည့် AITC၊ BITC နှင့် 4-HBITC တို့၏ အဆိပ်သင့်မှုကို Aedes ခြင်လောင်းများအပေါ် အကဲဖြတ်ခဲ့ပါသည်။ Aedes aegypti။ ခြင်လောင်းများပါဝင်သောရေထဲသို့ မျိုးစေ့မုန့်ညက်ကို တိုက်ရိုက်ထည့်ခြင်းသည် ခြင်လောင်းများအတွက် အဆိပ်သင့်စေသော isothiocyanates များကို ထုတ်လုပ်သည့် အင်ဇိုင်းလုပ်ငန်းစဉ်များကို အသက်ဝင်စေရန် မျှော်လင့်ရသည်။ ဤဇီဝပြောင်းလဲမှုကို မျိုးစေ့မုန့်ညက်၏ ပိုးလောင်းများကို သေစေနိုင်သော လုပ်ဆောင်ချက်နှင့် အသုံးမပြုမီ dwarf mustard မျိုးစေ့မုန့်ညက်ကို အပူပေးသောအခါ ပိုးကောင်များကို သေစေနိုင်သော လုပ်ဆောင်ချက် ဆုံးရှုံးသွားခြင်းတို့ဖြင့် တစ်စိတ်တစ်ပိုင်း သရုပ်ပြခဲ့သည်။ အပူပေးခြင်းသည် glucosinolates ကို အသက်ဝင်စေသော hydrolytic အင်ဇိုင်းများကို ဖျက်ဆီးပစ်ပြီး ဇီဝတက်ကြွ isothiocyanates ဖွဲ့စည်းမှုကို တားဆီးပေးလိမ့်မည်ဟု မျှော်လင့်ရသည်။ ရေနေပတ်ဝန်းကျင်တွင် ခြင်များကို တိုက်ဖျက်ရန် ဂေါ်ဖီထုပ်မျိုးစေ့မှုန့်၏ ပိုးကောင်များကို သေစေနိုင်သော ဂုဏ်သတ္တိများကို အတည်ပြုသည့် ပထမဆုံးလေ့လာမှုဖြစ်သည်။
စမ်းသပ်ထားသော မျိုးစေ့မှုန့်များထဲတွင် ရေမုန်ညင်းစေ့မှုန့် (Ls) သည် အဆိပ်အတောက်အရှိဆုံးဖြစ်ပြီး Aedes albopictus များ သေဆုံးမှုနှုန်း မြင့်မားစေပါသည်။ Aedes aegypti ပိုးလောင်းများကို ၂၄ နာရီကြာ အဆက်မပြတ် ပြုပြင်ပေးခဲ့ပါသည်။ ကျန်မျိုးစေ့မှုန့်သုံးမျိုး (PG၊ IG နှင့် DFP) သည် လှုပ်ရှားမှုနှေးကွေးပြီး စဉ်ဆက်မပြတ်ကုသမှု ၇၂ နာရီကြာပြီးနောက်ပင် သေဆုံးမှုနှုန်း သိသိသာသာ မြင့်တက်စေခဲ့ပါသည်။ Ls မျိုးစေ့မှုန့်တွင်သာ glucosinolates များစွာပါဝင်ပြီး PG နှင့် DFP တွင် myrosinase ပါဝင်ပြီး IG တွင် အဓိက glucosinolate အဖြစ် glucosinolate ပါရှိသည် (ဇယား ၁)။ Glucotropaeolin ကို BITC အဖြစ် ရေဓာတ်ပြိုကွဲစေပြီး sinalbine ကို 4-HBITC61,62 အဖြစ် ရေဓာတ်ပြိုကွဲစေပါသည်။ ကျွန်ုပ်တို့၏ bioassay ရလဒ်များအရ Ls မျိုးစေ့မှုန့်နှင့် ဓာတုဗေဒနည်းဖြင့်ပြုလုပ်ထားသော BITC နှစ်မျိုးလုံးသည် ခြင်လောင်းများအတွက် အလွန်အဆိပ်သင့်ကြောင်း ညွှန်ပြနေပါသည်။ PG နှင့် DFP မျိုးစေ့မှုန့်၏ အဓိကအစိတ်အပိုင်းမှာ myrosinase glucosinolate ဖြစ်ပြီး AITC အဖြစ် ရေဓာတ်ပြိုကွဲပါသည်။ AITC သည် LC50 တန်ဖိုး 19.35 ppm ဖြင့် ခြင်လောင်းများကို သတ်ရာတွင် ထိရောက်မှုရှိပါသည်။ AITC နှင့် BITC တို့နှင့် နှိုင်းယှဉ်ပါက 4-HBITC isothiocyanate သည် ပိုးလောင်းများအတွက် အဆိပ်အနည်းဆုံးဖြစ်သည်။ AITC သည် BITC ထက် အဆိပ်နည်းသော်လည်း၊ ၎င်းတို့၏ LC50 တန်ဖိုးများသည် ခြင်ပိုးလောင်းများတွင် စမ်းသပ်ထားသော အဆီများစွာထက် နိမ့်ကျပါသည်။32,73,74,75
ခြင်မျိုးဥများကို တိုက်ဖျက်ရန်အတွက် ကျွန်ုပ်တို့၏ cruciferous မျိုးစေ့မှုန့်တွင် အဓိက glucosinolate တစ်ခုပါဝင်ပြီး HPLC မှ ဆုံးဖြတ်ထားသည့်အတိုင်း glucosinolates စုစုပေါင်း၏ 98-99% ကျော်ရှိသည်။ အခြား glucosinolates အနည်းငယ်ကို တွေ့ရှိခဲ့သော်လည်း ၎င်းတို့၏အဆင့်သည် စုစုပေါင်း glucosinolates ၏ 0.3% အောက်သာရှိသည်။ Watercress (L. sativum) မျိုးစေ့မှုန့်တွင် ဒုတိယ glucosinolates (sinigrin) ပါဝင်သော်လည်း ၎င်းတို့၏ အချိုးအစားမှာ စုစုပေါင်း glucosinolates ၏ 1% သာရှိပြီး ၎င်းတို့၏ ပါဝင်မှုမှာ အရေးမပါလှပါ (0.4 mg/g မျိုးစေ့မှုန့်ခန့်)။ PG နှင့် DFP တွင် အဓိက glucosinolate (myrosin) တူညီသော်လည်း ၎င်းတို့၏ မျိုးစေ့အစာများ၏ ပိုးလောင်းများကို သေစေနိုင်သော လုပ်ဆောင်ချက်သည် ၎င်းတို့၏ LC50 တန်ဖိုးများကြောင့် သိသိသာသာ ကွဲပြားသည်။ အမှုန့်မှိုအတွက် အဆိပ်သင့်မှု ကွဲပြားသည်။ Aedes aegypti ပိုးလောင်းများ ပေါ်ပေါက်လာခြင်းသည် မျိုးစေ့အစာနှစ်မျိုးကြား myrosinase လုပ်ဆောင်ချက် သို့မဟုတ် တည်ငြိမ်မှု ကွဲပြားမှုကြောင့် ဖြစ်နိုင်သည်။ Myrosinase လုပ်ဆောင်ချက်သည် Brassicaceae အပင်များတွင် isothiocyanates ကဲ့သို့သော hydrolisis ထုတ်ကုန်များ၏ bioavailability တွင် အရေးကြီးသောအခန်းကဏ္ဍမှ ပါဝင်သည်။ Pocock et al.77 နှင့် Wilkinson et al.78 တို့၏ ယခင်အစီရင်ခံစာများတွင် myrosinase လုပ်ဆောင်ချက်နှင့် တည်ငြိမ်မှုပြောင်းလဲမှုများသည် မျိုးရိုးဗီဇနှင့် ပတ်ဝန်းကျင်ဆိုင်ရာအချက်များနှင့်လည်း ဆက်စပ်နေနိုင်ကြောင်း ပြသထားသည်။
မျှော်လင့်ထားသော ဇီဝတက်ကြွ isothiocyanate ပါဝင်မှုကို သက်ဆိုင်ရာ ဓာတုဗေဒအသုံးချမှုများနှင့် နှိုင်းယှဉ်ရန်အတွက် ၂၄ နာရီနှင့် ၇၂ နာရီတွင် မျိုးစေ့မှုန့်တစ်ခုစီ၏ LC50 တန်ဖိုးများအပေါ် အခြေခံ၍ တွက်ချက်ခဲ့သည် (ဇယား ၅)။ ၂၄ နာရီအကြာတွင် မျိုးစေ့မှုန့်ရှိ isothiocyanate များသည် သန့်စင်သောဒြပ်ပေါင်းများထက် ပိုမိုအဆိပ်သင့်စေပါသည်။ isothiocyanate မျိုးစေ့ကုသမှု၏ တစ်သန်းလျှင် အပိုင်း (ppm) အပေါ် အခြေခံ၍ တွက်ချက်ထားသော LC50 တန်ဖိုးများသည် BITC၊ AITC နှင့် 4-HBITC အသုံးချမှုများအတွက် LC50 တန်ဖိုးများထက် နိမ့်ကျနေပါသည်။ မျိုးစေ့မှုန့်လုံးများကို စားသုံးသော ပိုးလောင်းများကို ကျွန်ုပ်တို့ တွေ့ရှိခဲ့ရပါသည် (ပုံ ၃က)။ ထို့ကြောင့် မျိုးစေ့မှုန့်လုံးများကို စားသုံးခြင်းဖြင့် ပိုးလောင်းများသည် အဆိပ်သင့် isothiocyanate များကို ပိုမိုပြင်းထန်စွာ ထိတွေ့မှုကို ခံရနိုင်သည်။ ၎င်းကို ၂၄ နာရီထိတွေ့မှုတွင် IG နှင့် PG မျိုးစေ့မှုန့်ကုသမှုများတွင် အထင်ရှားဆုံးဖြစ်ပြီး LC50 ပါဝင်မှုများသည် သန့်စင်သော AITC နှင့် 4-HBITC ကုသမှုများထက် အသီးသီး ၇၅% နှင့် ၇၂% နိမ့်ကျပါသည်။ Ls နှင့် DFP ကုသမှုများသည် သန့်စင်သော isothiocyanate ထက် ပိုမိုအဆိပ်သင့်ပြီး LC50 တန်ဖိုးများသည် အသီးသီး 24% နှင့် 41% လျော့နည်းသည်။ ထိန်းချုပ်ကုသမှုတွင် ပိုးလောင်းများသည် အောင်မြင်စွာ ရုပ်ပွားဆင်းတုအဖြစ် ပြုလုပ်ခဲ့ကြသည် (ပုံ 3B)၊ အစေ့မှုန့်ကုသမှုတွင် ပိုးလောင်းအများစုမှာ ရုပ်ပွားဆင်းတုမပြုလုပ်ခဲ့ဘဲ ပိုးလောင်းဖွံ့ဖြိုးမှုမှာ သိသိသာသာ နှောင့်နှေးခဲ့သည် (ပုံ 3B၊ D)။ Spodopteralitura တွင် isothiocyanates များသည် ကြီးထွားမှုနှောင့်နှေးခြင်းနှင့် ဖွံ့ဖြိုးမှုနှောင့်နှေးခြင်းနှင့် ဆက်စပ်နေသည်79။
Ae. Aedes aegypti ခြင်များ၏ ပိုးလောင်းများကို Brassica မျိုးစေ့မှုန့်ဖြင့် ၂၄-၇၂ နာရီကြာ အဆက်မပြတ်ထိတွေ့စေခဲ့သည်။ (က) ပါးစပ်ထဲတွင် မျိုးစေ့မှုန့်အမှုန်အမွှားများပါသည့် သေဆုံးနေသော ပိုးလောင်းများ (ဝိုင်းပြထားသည်)။ (ခ) ထိန်းချုပ်ကုသမှု (မျိုးစေ့မှုန့်မထည့်ဘဲ dH20) တွင် ပိုးလောင်းများသည် ပုံမှန်ကြီးထွားပြီး ၇၂ နာရီအကြာတွင် ရုပ်လောင်းဖြစ်လာကြောင်း ပြသသည် (ဂ၊ ဃ)။ မျိုးစေ့မှုန့်ဖြင့် ကုသထားသော ပိုးလောင်းများ၊ မျိုးစေ့မှုန့်သည် ဖွံ့ဖြိုးမှုတွင် ကွဲပြားမှုများကို ပြသပြီး ရုပ်လောင်းမဖြစ်ခဲ့ပေ။
ခြင်လောင်းများအပေါ် isothiocyanates ၏ အဆိပ်သင့်အကျိုးသက်ရောက်မှုယန္တရားကို ကျွန်ုပ်တို့ မလေ့လာရသေးပါ။ သို့သော်၊ အနီရောင်မီးပုရွက်ဆိတ်များ (Solenopsis invicta) တွင်ယခင်လေ့လာမှုများအရ glutathione S-transferase (GST) နှင့် esterase (EST) တို့ကို ဟန့်တားခြင်းသည် isothiocyanate ဇီဝဖြစ်စဉ်၏ အဓိကယန္တရားဖြစ်ပြီး၊ AITC သည် လှုပ်ရှားမှုနည်းသော်လည်း GST လှုပ်ရှားမှုကိုလည်း ဟန့်တားနိုင်သည်။ ပြင်းအားနည်းသော တင်သွင်းလာသော အနီရောင်မီးပုရွက်ဆိတ်များ။ ပမာဏမှာ 0.5 µg/ml80 ဖြစ်သည်။ ဆန့်ကျင်ဘက်အားဖြင့်၊ AITC သည် အရွယ်ရောက်ပြီးသော ပြောင်းဖူးပိုးများ (Sitophilus zeamais)81 ရှိ acetylcholinesterase ကို ဟန့်တားသည်။ ခြင်လောင်းများတွင် isothiocyanate လှုပ်ရှားမှုယန္တရားကို ရှင်းလင်းစေရန် အလားတူလေ့လာမှုများ ပြုလုပ်ရမည်ဖြစ်သည်။
ကျွန်ုပ်တို့သည် အပူပေးထားသော DFP ကုသမှုကို အသုံးပြု၍ အပင် glucosinolates များကို hydrolysis လုပ်ခြင်းဖြင့် reactive isothiocyanates များဖွဲ့စည်းခြင်းဖြင့် ခြင်ကောင်များကို ထိန်းချုပ်ရန် မုန်ညင်းစေ့မှုန့်ဖြင့် လုပ်ဆောင်သည်ဟူသော အဆိုပြုချက်ကို ထောက်ခံပါသည်။ DFP-HT မျိုးစေ့မှုန့်သည် စမ်းသပ်ထားသော အသုံးချမှုနှုန်းထားများတွင် အဆိပ်အတောက်မရှိပါ။ Lafarga et al. 82 မှ glucosinolates များသည် မြင့်မားသောအပူချိန်တွင် ပြိုကွဲမှုကို ထိခိုက်လွယ်ကြောင်း ဖော်ပြခဲ့သည်။ အပူပေးခြင်းသည် မျိုးစေ့မှုန့်ရှိ myrosinase အင်ဇိုင်းကို ပျက်စီးစေပြီး glucosinolates များ၏ hydrolysis ကို reactive isothiocyanates များဖွဲ့စည်းခြင်းမှ ကာကွယ်ပေးမည်ဟုလည်း မျှော်လင့်ရသည်။ ၎င်းကို Okunade et al. 75 မှလည်း အတည်ပြုခဲ့ပြီး myrosinase သည် အပူချိန်ကို ထိခိုက်လွယ်ကြောင်း ပြသခဲ့ပြီး မုန်ညင်း၊ black mustard နှင့် bloodroot မျိုးစေ့များကို 80°C အထက် အပူချိန်တွင် ထိတွေ့သောအခါ myrosinase လုပ်ဆောင်ချက်သည် လုံးဝရပ်တန့်သွားကြောင်း ပြသခဲ့သည်။ ဤယန္တရားများသည် အပူပေးထားသော DFP မျိုးစေ့မှုန့်၏ ပိုးသတ်ဆေးလုပ်ဆောင်ချက်ကို ဆုံးရှုံးစေနိုင်သည်။
ထို့ကြောင့် မုန်ညင်းစေ့မှုန့်နှင့် ၎င်း၏ အဓိက isothiocyanates သုံးမျိုးသည် ခြင်လောင်းများအတွက် အဆိပ်သင့်ပါသည်။ မျိုးစေ့မှုန့်နှင့် ဓာတုကုသမှုများအကြား ဤကွာခြားချက်များကို ထည့်သွင်းစဉ်းစားလျှင် မျိုးစေ့မှုန့်ကိုအသုံးပြုခြင်းသည် ခြင်ထိန်းချုပ်ရေး၏ ထိရောက်သောနည်းလမ်းတစ်ခု ဖြစ်နိုင်သည်။ မျိုးစေ့မှုန့်အသုံးပြုမှု၏ ထိရောက်မှုနှင့် တည်ငြိမ်မှုကို မြှင့်တင်ရန်အတွက် သင့်လျော်သော ဖော်မြူလာများနှင့် ထိရောက်သော ပို့ဆောင်ရေးစနစ်များကို ဖော်ထုတ်ရန် လိုအပ်ပါသည်။ ကျွန်ုပ်တို့၏ရလဒ်များက ဓာတုပိုးသတ်ဆေးများအစား မုန်ညင်းစေ့မှုန့်ကို အသုံးပြုနိုင်ဖွယ်ရှိကြောင်း ညွှန်ပြနေပါသည်။ ဤနည်းပညာသည် ခြင်သယ်ဆောင်သူများကို ထိန်းချုပ်ရန်အတွက် ဆန်းသစ်သောကိရိယာတစ်ခု ဖြစ်လာနိုင်သည်။ ခြင်လောင်းများသည် ရေနေပတ်ဝန်းကျင်တွင် ကောင်းစွာကြီးထွားပြီး မျိုးစေ့မှုန့် glucosinolates များကို ရေဓာတ်ဖြည့်တင်းသောအခါ active isothiocyanates အဖြစ် အင်ဇိုင်းဖြင့် ပြောင်းလဲထားသောကြောင့် ခြင်များပေါက်ပွားနေသောရေတွင် မုန်ညင်းစေ့မှုန့်ကိုအသုံးပြုခြင်းသည် သိသာထင်ရှားသော ထိန်းချုပ်နိုင်စွမ်းကို ပေးစွမ်းသည်။ isothiocyanates ၏ ပိုးလောင်းများကို သေစေနိုင်သော လုပ်ဆောင်ချက်သည် ကွဲပြားသော်လည်း (BITC > AITC > 4-HBITC)၊ မျိုးစေ့မှုန့်ကို glucosinolates များစွာနှင့် ပေါင်းစပ်ခြင်းသည် အဆိပ်သင့်မှုကို တိုးစေသည်ဖြစ်စေ မတိုးစေသည်ကို ဆုံးဖြတ်ရန် သုတေသနပိုမိုလိုအပ်ပါသည်။ အဆီထုတ်ထားသော cruciferous မျိုးစေ့မှုန့်နှင့် ဇီဝတက်ကြွ isothiocyanates သုံးမျိုး၏ ခြင်များအပေါ် ပိုးသတ်ဆေးအာနိသင်များကို ပြသသည့် ပထမဆုံးလေ့လာမှုဖြစ်သည်။ ဤလေ့လာမှု၏ရလဒ်များသည် အစေ့များမှဆီထုတ်ယူခြင်း၏ ဘေးထွက်ပစ္စည်းဖြစ်သော အဆီထုတ်ထားသော ဂေါ်ဖီထုပ်စေ့မှုန့်သည် ခြင်ထိန်းချုပ်ရေးအတွက် အလားအလာရှိသော ပိုးလောင်းသတ်ဆေးအဖြစ် ဆောင်ရွက်နိုင်ကြောင်း ပြသခြင်းဖြင့် ခြေလှမ်းသစ်တစ်ရပ်ကို ချိုးဖျက်လိုက်ပါသည်။ ဤအချက်အလက်သည် အပင်ဇီဝထိန်းချုပ်ဆေးများ ရှာဖွေတွေ့ရှိမှုနှင့် ၎င်းတို့ကို ဈေးသက်သာ၊ လက်တွေ့ကျပြီး ပတ်ဝန်းကျင်နှင့် သဟဇာတဖြစ်သော ဇီဝပိုးသတ်ဆေးများအဖြစ် ဖွံ့ဖြိုးတိုးတက်စေရန် အထောက်အကူဖြစ်စေနိုင်ပါသည်။
ဤလေ့လာမှုအတွက် ထုတ်လုပ်ထားသော အချက်အလက်အစုများနှင့် ရလဒ်ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုများကို သက်ဆိုင်ရာစာရေးသူထံမှ ကျိုးကြောင်းဆီလျော်သော တောင်းဆိုမှုဖြင့် ရရှိနိုင်ပါသည်။ လေ့လာမှုအဆုံးတွင် လေ့လာမှုတွင်အသုံးပြုသော ပစ္စည်းအားလုံး (အင်းဆက်ပိုးမွှားများနှင့် အစေ့မှုန့်) ကို ဖျက်ဆီးခဲ့သည်။
ပို့စ်တင်ချိန်: ၂၀၂၄ ခုနှစ်၊ ဇူလိုင်လ ၂၉ ရက်



